西北农林科技大学学报(自然科学版)
西北農林科技大學學報(自然科學版)
서북농림과기대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2008年
3期
33-38
,共6页
郑红梅%呼天明%王佺珍%张国云%宋江湖%胡晓宁
鄭紅梅%呼天明%王佺珍%張國雲%宋江湖%鬍曉寧
정홍매%호천명%왕전진%장국운%송강호%호효저
嵩草%AFLP体系%引物筛选
嵩草%AFLP體繫%引物篩選
숭초%AFLP체계%인물사선
[目的]建立一套适用于嵩草的AFLP技术体系.[方法]参考前人在其他物种上的研究结果,对嵩草AFLP体系的影响因素(包括模板DNA的制备、Mse Ⅰ/EcoR Ⅰ以及T4 DNA连接酶的浓度、反应时间以及反应体系的组成等)进行研究,建立适用于嵩草的AFLP分析体系,并对引物进行了筛选.[结果]用于酶切的嵩草基因组DNA模板以600 ng为宜,连接最适反应时间为10 h,预扩增产物最适稀释倍数为5倍.E-ACC+M-CAG、E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG 3对引物均适合于嵩草AFLP分析,其中以E-ACA+M-CAG引物组合效果最佳,扩增出101条多态性带,多态性带比率为99.02%.[结论]建立的AFLP技术体系可用于嵩草AFLP分析,用该体系可得到条带清晰多态性好的嵩草AFLP指纹图谱.适合嵩草种质资源研究的引物组合有E-ACC+M-CAG,E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG,其中E-ACA+M-CAG组合的效果最好.
[目的]建立一套適用于嵩草的AFLP技術體繫.[方法]參攷前人在其他物種上的研究結果,對嵩草AFLP體繫的影響因素(包括模闆DNA的製備、Mse Ⅰ/EcoR Ⅰ以及T4 DNA連接酶的濃度、反應時間以及反應體繫的組成等)進行研究,建立適用于嵩草的AFLP分析體繫,併對引物進行瞭篩選.[結果]用于酶切的嵩草基因組DNA模闆以600 ng為宜,連接最適反應時間為10 h,預擴增產物最適稀釋倍數為5倍.E-ACC+M-CAG、E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG 3對引物均適閤于嵩草AFLP分析,其中以E-ACA+M-CAG引物組閤效果最佳,擴增齣101條多態性帶,多態性帶比率為99.02%.[結論]建立的AFLP技術體繫可用于嵩草AFLP分析,用該體繫可得到條帶清晰多態性好的嵩草AFLP指紋圖譜.適閤嵩草種質資源研究的引物組閤有E-ACC+M-CAG,E-ACA+M-CAG和E-ACA+M-CTG,其中E-ACA+M-CAG組閤的效果最好.
[목적]건립일투괄용우숭초적AFLP기술체계.[방법]삼고전인재기타물충상적연구결과,대숭초AFLP체계적영향인소(포괄모판DNA적제비、Mse Ⅰ/EcoR Ⅰ이급T4 DNA련접매적농도、반응시간이급반응체계적조성등)진행연구,건립괄용우숭초적AFLP분석체계,병대인물진행료사선.[결과]용우매절적숭초기인조DNA모판이600 ng위의,련접최괄반응시간위10 h,예확증산물최괄희석배수위5배.E-ACC+M-CAG、E-ACA+M-CAG화E-ACA+M-CTG 3대인물균괄합우숭초AFLP분석,기중이E-ACA+M-CAG인물조합효과최가,확증출101조다태성대,다태성대비솔위99.02%.[결론]건립적AFLP기술체계가용우숭초AFLP분석,용해체계가득도조대청석다태성호적숭초AFLP지문도보.괄합숭초충질자원연구적인물조합유E-ACC+M-CAG,E-ACA+M-CAG화E-ACA+M-CTG,기중E-ACA+M-CAG조합적효과최호.