中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
2006年
6期
516-520
,共5页
王红%赵蔚明%齐眉%周亚滨%栾怡%程轶喆%于修平
王紅%趙蔚明%齊眉%週亞濱%欒怡%程軼喆%于脩平
왕홍%조위명%제미%주아빈%란이%정질철%우수평
乳头状瘤病毒%L1基因%tRNA%蛋白表达%DNA免疫
乳頭狀瘤病毒%L1基因%tRNA%蛋白錶達%DNA免疫
유두상류병독%L1기인%tRNA%단백표체%DNA면역
目的探讨促进乳头状瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白表达和DNA疫苗免疫效应的途径及可能的机制.方法分别将含人源化优化密码BPVL1-GFP融合基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融合基因(WL1-GFP)的真核表达质粒体外单独转染或与tRNAser真核表达质粒共转染人角质形成细胞HaCAT,荧光显微镜及Western blot方法观察L1-GFP融合蛋白的瞬时表达情况.半定量RT-PCR分析不同PV L1基因mRNA的表达.BALB/c小鼠股四头肌内分别接种野生型、优化密码L1DNA疫苗,同时将L1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合后接种小鼠,观察诱导产生的体液免疫反应.结果野生型WL1-GFP融合基因在HaCAT细胞中未能有效表达,优化密码HL1-GFP基因在HaCAT细胞中的蛋白表达水平明显增强;但两者在mRNA水平差异无统计学意义.WL1-GFP与tR-NAser真核表达质粒共转染细胞中L1蛋白的表达较单独转染WL1-GFP基因时增强.动物DNA免疫结果表明,优化密码HL1 DNA疫苗接种可使小鼠特异性L1中和抗体水平明显升高;而野生型WL1DNA疫苗接种组小鼠仅产生低滴度的L1抗体,WL1 DNA疫苗与tRNAser真核表达质粒混合接种使小鼠的L1抗体水平增加.结论优化密码能显著促进乳头状瘤病毒晚期基因L1在哺乳动物细胞中的表达和DNA疫苗的免疫反应;补充外源tRNAser基因能够提高野生型L1基因的蛋白表达和DNA疫苗诱导的体液免疫应答.
目的探討促進乳頭狀瘤病毒(PV)晚期基因L1的蛋白錶達和DNA疫苗免疫效應的途徑及可能的機製.方法分彆將含人源化優化密碼BPVL1-GFP融閤基因(HL1-GFP)和野生型BPVL1-GFP融閤基因(WL1-GFP)的真覈錶達質粒體外單獨轉染或與tRNAser真覈錶達質粒共轉染人角質形成細胞HaCAT,熒光顯微鏡及Western blot方法觀察L1-GFP融閤蛋白的瞬時錶達情況.半定量RT-PCR分析不同PV L1基因mRNA的錶達.BALB/c小鼠股四頭肌內分彆接種野生型、優化密碼L1DNA疫苗,同時將L1 DNA疫苗與tRNAser真覈錶達質粒混閤後接種小鼠,觀察誘導產生的體液免疫反應.結果野生型WL1-GFP融閤基因在HaCAT細胞中未能有效錶達,優化密碼HL1-GFP基因在HaCAT細胞中的蛋白錶達水平明顯增彊;但兩者在mRNA水平差異無統計學意義.WL1-GFP與tR-NAser真覈錶達質粒共轉染細胞中L1蛋白的錶達較單獨轉染WL1-GFP基因時增彊.動物DNA免疫結果錶明,優化密碼HL1 DNA疫苗接種可使小鼠特異性L1中和抗體水平明顯升高;而野生型WL1DNA疫苗接種組小鼠僅產生低滴度的L1抗體,WL1 DNA疫苗與tRNAser真覈錶達質粒混閤接種使小鼠的L1抗體水平增加.結論優化密碼能顯著促進乳頭狀瘤病毒晚期基因L1在哺乳動物細胞中的錶達和DNA疫苗的免疫反應;補充外源tRNAser基因能夠提高野生型L1基因的蛋白錶達和DNA疫苗誘導的體液免疫應答.
목적탐토촉진유두상류병독(PV)만기기인L1적단백표체화DNA역묘면역효응적도경급가능적궤제.방법분별장함인원화우화밀마BPVL1-GFP융합기인(HL1-GFP)화야생형BPVL1-GFP융합기인(WL1-GFP)적진핵표체질립체외단독전염혹여tRNAser진핵표체질립공전염인각질형성세포HaCAT,형광현미경급Western blot방법관찰L1-GFP융합단백적순시표체정황.반정량RT-PCR분석불동PV L1기인mRNA적표체.BALB/c소서고사두기내분별접충야생형、우화밀마L1DNA역묘,동시장L1 DNA역묘여tRNAser진핵표체질립혼합후접충소서,관찰유도산생적체액면역반응.결과야생형WL1-GFP융합기인재HaCAT세포중미능유효표체,우화밀마HL1-GFP기인재HaCAT세포중적단백표체수평명현증강;단량자재mRNA수평차이무통계학의의.WL1-GFP여tR-NAser진핵표체질립공전염세포중L1단백적표체교단독전염WL1-GFP기인시증강.동물DNA면역결과표명,우화밀마HL1 DNA역묘접충가사소서특이성L1중화항체수평명현승고;이야생형WL1DNA역묘접충조소서부산생저적도적L1항체,WL1 DNA역묘여tRNAser진핵표체질립혼합접충사소서적L1항체수평증가.결론우화밀마능현저촉진유두상류병독만기기인L1재포유동물세포중적표체화DNA역묘적면역반응;보충외원tRNAser기인능구제고야생형L1기인적단백표체화DNA역묘유도적체액면역응답.
