微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2000年
3期
296-300
,共5页
根瘤菌%parCBA/DE%luxAB%质粒稳定性
根瘤菌%parCBA/DE%luxAB%質粒穩定性
근류균%parCBA/DE%luxAB%질립은정성
以发光酶基因luxAB作为报告基因,将广谱稳定性质粒pTRl02的parCBA/DE基因导人含3.7kL增效片段的pLARF3并去除该质粒的cos序列,构建成重组质粒pHN115和pHNl56.同时,构建只带有COS序列和luxAB的参比质粒pHNl57和pHNl58.将上述4种质粒通过三亲本杂交分别导人费氏中华根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01,将pHNl55和pHNl58通过两亲本杂交分别导人大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonzcum)TAll,在人工继代培养条件下比较测定其质粒保持率.结果表明;经连续转接培养7次后,pHNl55、pHNl56、pHNl57和pHNl58在HN01中的质粒保持率分别为100%、67%、72%和92%.连续转接培养4次后,pHNl55和pHNl58在TAll中的质粒保持率分别为98%和92%.说明parCJ[3A/DE基因能显著提高质粒在快、慢生型大豆根瘤菌中的遗传稳定性,COS序列的去除也有一定的作用.
以髮光酶基因luxAB作為報告基因,將廣譜穩定性質粒pTRl02的parCBA/DE基因導人含3.7kL增效片段的pLARF3併去除該質粒的cos序列,構建成重組質粒pHN115和pHNl56.同時,構建隻帶有COS序列和luxAB的參比質粒pHNl57和pHNl58.將上述4種質粒通過三親本雜交分彆導人費氏中華根瘤菌(Sinorhizobium fredii)HN01,將pHNl55和pHNl58通過兩親本雜交分彆導人大豆慢生根瘤菌(Bradyrhizobium japonzcum)TAll,在人工繼代培養條件下比較測定其質粒保持率.結果錶明;經連續轉接培養7次後,pHNl55、pHNl56、pHNl57和pHNl58在HN01中的質粒保持率分彆為100%、67%、72%和92%.連續轉接培養4次後,pHNl55和pHNl58在TAll中的質粒保持率分彆為98%和92%.說明parCJ[3A/DE基因能顯著提高質粒在快、慢生型大豆根瘤菌中的遺傳穩定性,COS序列的去除也有一定的作用.
이발광매기인luxAB작위보고기인,장엄보은정성질립pTRl02적parCBA/DE기인도인함3.7kL증효편단적pLARF3병거제해질립적cos서렬,구건성중조질립pHN115화pHNl56.동시,구건지대유COS서렬화luxAB적삼비질립pHNl57화pHNl58.장상술4충질립통과삼친본잡교분별도인비씨중화근류균(Sinorhizobium fredii)HN01,장pHNl55화pHNl58통과량친본잡교분별도인대두만생근류균(Bradyrhizobium japonzcum)TAll,재인공계대배양조건하비교측정기질립보지솔.결과표명;경련속전접배양7차후,pHNl55、pHNl56、pHNl57화pHNl58재HN01중적질립보지솔분별위100%、67%、72%화92%.련속전접배양4차후,pHNl55화pHNl58재TAll중적질립보지솔분별위98%화92%.설명parCJ[3A/DE기인능현저제고질립재쾌、만생형대두근류균중적유전은정성,COS서렬적거제야유일정적작용.
