基础医学与临床
基礎醫學與臨床
기출의학여림상
BASIC MEDICAL SCIENCES AND CLINICS
2005年
1期
44-48
,共5页
孙朝晖%赖燕来%曾文文%左焕琮%谢佐平
孫朝暉%賴燕來%曾文文%左煥琮%謝佐平
손조휘%뢰연래%증문문%좌환종%사좌평
SHH-N%Wistar大鼠%脊索%序列分析%蛋白表达
SHH-N%Wistar大鼠%脊索%序列分析%蛋白錶達
SHH-N%Wistar대서%척색%서렬분석%단백표체
为了获得SHH蛋白以研究它在治疗神经变性疾病中的作用,本室提取不同胚龄Wistar胎鼠中的总RNA,应用RT-PCR技术获得SHH-N的cDNA,重组于pGEM-T载体,经测序鉴定后,构建原核表达质粒并获得表达菌株Q15-SHH-N,然后诱导SHH蛋白的表达.结果发现,在E11.5-E20.5胎鼠的脊索中能克隆到630 bp的cDNA片段,并且随胚龄增加,此片段的表达量逐渐减少;测序结果显示,此片段及其所编码的氨基酸序列同数据库中人、小鼠和SD大鼠的SHH-N的序列有较高同源性;表达菌株经诱导后产生约21 kD的融合蛋白.提示SHH-N是一种发育相关基因,在不同种属中的同源性较高,并且在原核系统中能进行表达.
為瞭穫得SHH蛋白以研究它在治療神經變性疾病中的作用,本室提取不同胚齡Wistar胎鼠中的總RNA,應用RT-PCR技術穫得SHH-N的cDNA,重組于pGEM-T載體,經測序鑒定後,構建原覈錶達質粒併穫得錶達菌株Q15-SHH-N,然後誘導SHH蛋白的錶達.結果髮現,在E11.5-E20.5胎鼠的脊索中能剋隆到630 bp的cDNA片段,併且隨胚齡增加,此片段的錶達量逐漸減少;測序結果顯示,此片段及其所編碼的氨基痠序列同數據庫中人、小鼠和SD大鼠的SHH-N的序列有較高同源性;錶達菌株經誘導後產生約21 kD的融閤蛋白.提示SHH-N是一種髮育相關基因,在不同種屬中的同源性較高,併且在原覈繫統中能進行錶達.
위료획득SHH단백이연구타재치료신경변성질병중적작용,본실제취불동배령Wistar태서중적총RNA,응용RT-PCR기술획득SHH-N적cDNA,중조우pGEM-T재체,경측서감정후,구건원핵표체질립병획득표체균주Q15-SHH-N,연후유도SHH단백적표체.결과발현,재E11.5-E20.5태서적척색중능극륭도630 bp적cDNA편단,병차수배령증가,차편단적표체량축점감소;측서결과현시,차편단급기소편마적안기산서렬동수거고중인、소서화SD대서적SHH-N적서렬유교고동원성;표체균주경유도후산생약21 kD적융합단백.제시SHH-N시일충발육상관기인,재불동충속중적동원성교고,병차재원핵계통중능진행표체.
