农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2005年
2期
207-211
,共5页
王宇%安晓荣%柳青%苟克勉
王宇%安曉榮%柳青%茍剋勉
왕우%안효영%류청%구극면
棉花%脂肪酸脱氢酶-2%fad2基因脂肪酸脱氨酶-2%转基因%小鼠
棉花%脂肪痠脫氫酶-2%fad2基因脂肪痠脫氨酶-2%轉基因%小鼠
면화%지방산탈경매-2%fad2기인지방산탈안매-2%전기인%소서
以pEGFP-N1质粒为基础载体,切除gfp基因的编码序列后,在多克隆位点依次插入动物肌肉α-actin启动子和棉花ω-6脂肪酸脱氢酶编码基因fad2(fatty acid desaturase-2)的cDNA序列,构建成fad2cDNA真核表达载体.用显微注射方法,将线性化的载体DNA注入KM ×B6D2F1小鼠受精卵的的原核内部,然后将胚胎移植到输卵管内,13只受体怀孕产仔.合计移植了286枚受精卵,最后获得34只健康的成年小鼠,PCR方法检测确认5只为阳性小鼠,Southernblot证明只有1只阳性转基因小鼠.
以pEGFP-N1質粒為基礎載體,切除gfp基因的編碼序列後,在多剋隆位點依次插入動物肌肉α-actin啟動子和棉花ω-6脂肪痠脫氫酶編碼基因fad2(fatty acid desaturase-2)的cDNA序列,構建成fad2cDNA真覈錶達載體.用顯微註射方法,將線性化的載體DNA註入KM ×B6D2F1小鼠受精卵的的原覈內部,然後將胚胎移植到輸卵管內,13隻受體懷孕產仔.閤計移植瞭286枚受精卵,最後穫得34隻健康的成年小鼠,PCR方法檢測確認5隻為暘性小鼠,Southernblot證明隻有1隻暘性轉基因小鼠.
이pEGFP-N1질립위기출재체,절제gfp기인적편마서렬후,재다극륭위점의차삽입동물기육α-actin계동자화면화ω-6지방산탈경매편마기인fad2(fatty acid desaturase-2)적cDNA서렬,구건성fad2cDNA진핵표체재체.용현미주사방법,장선성화적재체DNA주입KM ×B6D2F1소서수정란적적원핵내부,연후장배태이식도수란관내,13지수체부잉산자.합계이식료286매수정란,최후획득34지건강적성년소서,PCR방법검측학인5지위양성소서,Southernblot증명지유1지양성전기인소서.
