CAJ | 학술논문

目的:探讨应用植入转染血小板源性生长因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)基因的骨髓间充质干细胞的灭活同种异体跟腱重建兔前交叉韧带(anterior cruciate ligament,ACL)的效果.方法:取新西兰白兔自体骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),培养后感染稳定表达PDGF-BB逆转录病毒,种植于经γ射线照射灭活的同种异体跟腱上,进行前交叉韧带重建.实验分对照组(移植物为单纯灭活跟腱)、细胞组(移植物为种植MSCs的灭活的跟腱)和基因组(移植物为转染基因的MSCs种植于灭活的跟腱)三组.术后3周、6周、12周,分别进行组织学及免疫组织化学染色,观察关节腔内移植物的变化过程及力学拉伸试验观察韧带的生物力学改变.结果:术后3周移植物表面已经覆盖大量从受体来的炎性细胞,对照组细胞量明显少于细胞组和基因组.细胞由移植物表面逐渐进入深部,基因组中随大量细胞进入的同时还伴有血管的增生,形成典型的肉芽组织.而对照组和细胞组血管增生不明显.手术后6周,对照组、细胞组和基因组都显现细胞到达移植物深部,甲苯胺蓝染色显示细胞组和基因组移植物的异染阳性,但对照组为阴性.手术后12周,对照组显现移植物内有大量的成纤维细胞,甲苯胺蓝染色轻度异染;而细胞组和基因组细胞量减少,显现类软骨性状,细胞排列与正常前交叉韧带接近.胶原分型的免疫组化染色三组均显示工型胶原为主的移植物在植入后经过Ⅲ型胶原替代,后由Ⅲ型胶原为主逐步过渡到重新以Ⅰ型胶原为主.这个转换过程基因组最快,对照组最慢.手术后3、6和12周移植物的刚度和最大载荷与移植前相比均有明显下降,以3周下降最明显.术后6周,移植物刚度和最大载荷开始上升,细胞组和基因组上升明显,与对照组有显著性差异.结论:转染PDGF-BB基因的自体骨髓间充质干细胞有促进重建韧带血管化、加速韧带成熟的作用. 目的:探討應用植入轉染血小闆源性生長因子(Platelet-derived growth factor,PDGF)基因的骨髓間充質榦細胞的滅活同種異體跟腱重建兔前交扠韌帶(anterior cruciate ligament,ACL)的效果.方法:取新西蘭白兔自體骨髓間充質榦細胞(mesenchymal stem cells,MSCs),培養後感染穩定錶達PDGF-BB逆轉錄病毒,種植于經γ射線照射滅活的同種異體跟腱上,進行前交扠韌帶重建.實驗分對照組(移植物為單純滅活跟腱)、細胞組(移植物為種植MSCs的滅活的跟腱)和基因組(移植物為轉染基因的MSCs種植于滅活的跟腱)三組.術後3週、6週、12週,分彆進行組織學及免疫組織化學染色,觀察關節腔內移植物的變化過程及力學拉伸試驗觀察韌帶的生物力學改變.結果:術後3週移植物錶麵已經覆蓋大量從受體來的炎性細胞,對照組細胞量明顯少于細胞組和基因組.細胞由移植物錶麵逐漸進入深部,基因組中隨大量細胞進入的同時還伴有血管的增生,形成典型的肉芽組織.而對照組和細胞組血管增生不明顯.手術後6週,對照組、細胞組和基因組都顯現細胞到達移植物深部,甲苯胺藍染色顯示細胞組和基因組移植物的異染暘性,但對照組為陰性.手術後12週,對照組顯現移植物內有大量的成纖維細胞,甲苯胺藍染色輕度異染;而細胞組和基因組細胞量減少,顯現類軟骨性狀,細胞排列與正常前交扠韌帶接近.膠原分型的免疫組化染色三組均顯示工型膠原為主的移植物在植入後經過Ⅲ型膠原替代,後由Ⅲ型膠原為主逐步過渡到重新以Ⅰ型膠原為主.這箇轉換過程基因組最快,對照組最慢.手術後3、6和12週移植物的剛度和最大載荷與移植前相比均有明顯下降,以3週下降最明顯.術後6週,移植物剛度和最大載荷開始上升,細胞組和基因組上升明顯,與對照組有顯著性差異.結論:轉染PDGF-BB基因的自體骨髓間充質榦細胞有促進重建韌帶血管化、加速韌帶成熟的作用.
목적:탐토응용식입전염혈소판원성생장인자(Platelet-derived growth factor,PDGF)기인적골수간충질간세포적멸활동충이체근건중건토전교차인대(anterior cruciate ligament,ACL)적효과.방법:취신서란백토자체골수간충질간세포(mesenchymal stem cells,MSCs),배양후감염은정표체PDGF-BB역전록병독,충식우경γ사선조사멸활적동충이체근건상,진행전교차인대중건.실험분대조조(이식물위단순멸활근건)、세포조(이식물위충식MSCs적멸활적근건)화기인조(이식물위전염기인적MSCs충식우멸활적근건)삼조.술후3주、6주、12주,분별진행조직학급면역조직화학염색,관찰관절강내이식물적변화과정급역학랍신시험관찰인대적생물역학개변.결과:술후3주이식물표면이경복개대량종수체래적염성세포,대조조세포량명현소우세포조화기인조.세포유이식물표면축점진입심부,기인조중수대량세포진입적동시환반유혈관적증생,형성전형적육아조직.이대조조화세포조혈관증생불명현.수술후6주,대조조、세포조화기인조도현현세포도체이식물심부,갑분알람염색현시세포조화기인조이식물적이염양성,단대조조위음성.수술후12주,대조조현현이식물내유대량적성섬유세포,갑분알람염색경도이염;이세포조화기인조세포량감소,현현류연골성상,세포배렬여정상전교차인대접근.효원분형적면역조화염색삼조균현시공형효원위주적이식물재식입후경과Ⅲ형효원체대,후유Ⅲ형효원위주축보과도도중신이Ⅰ형효원위주.저개전환과정기인조최쾌,대조조최만.수술후3、6화12주이식물적강도화최대재하여이식전상비균유명현하강,이3주하강최명현.술후6주,이식물강도화최대재하개시상승,세포조화기인조상승명현,여대조조유현저성차이.결론:전염PDGF-BB기인적자체골수간충질간세포유촉진중건인대혈관화、가속인대성숙적작용.