细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2008年
6期
560-563
,共4页
吴元明%张晓楠%邢小红%张俊杰%陈南春%陈苏民
吳元明%張曉楠%邢小紅%張俊傑%陳南春%陳囌民
오원명%장효남%형소홍%장준걸%진남춘%진소민
人Era%可溶性表达%生物活性测定
人Era%可溶性錶達%生物活性測定
인Era%가용성표체%생물활성측정
目的:为了得到可溶性表达的人Era(hEra)蛋白,并检测其生物学活性.方法:把人era的cDNA基因从pUC19质粒亚克隆人表达质粒pMAL-p2x中.pMAL-hEra转化大肠杆菌TB1,用异丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达.结果:pMAL-hEra载体表达的融合蛋白是以可溶状态存在,表达量占菌体总蛋白的23.9%.再利用直链淀粉亲和色谱柱对表达的融合蛋白进行纯化,接着用因子X将融合部分切除,但切除后的hEra蛋白不稳定,随着时间的延长而被降解.活性测定结果表明人Era蛋白能与GTP结合,并具有GTP酶的活性.结论:可溶性表达了人Era蛋白,并用体外实验证实人Era蛋白是一种G蛋白,这对人era基因的功能研究具有重要意义.
目的:為瞭得到可溶性錶達的人Era(hEra)蛋白,併檢測其生物學活性.方法:把人era的cDNA基因從pUC19質粒亞剋隆人錶達質粒pMAL-p2x中.pMAL-hEra轉化大腸桿菌TB1,用異丙基硫代-B-D-半乳糖苷(IPTG)誘導錶達.結果:pMAL-hEra載體錶達的融閤蛋白是以可溶狀態存在,錶達量佔菌體總蛋白的23.9%.再利用直鏈澱粉親和色譜柱對錶達的融閤蛋白進行純化,接著用因子X將融閤部分切除,但切除後的hEra蛋白不穩定,隨著時間的延長而被降解.活性測定結果錶明人Era蛋白能與GTP結閤,併具有GTP酶的活性.結論:可溶性錶達瞭人Era蛋白,併用體外實驗證實人Era蛋白是一種G蛋白,這對人era基因的功能研究具有重要意義.
목적:위료득도가용성표체적인Era(hEra)단백,병검측기생물학활성.방법:파인era적cDNA기인종pUC19질립아극륭인표체질립pMAL-p2x중.pMAL-hEra전화대장간균TB1,용이병기류대-B-D-반유당감(IPTG)유도표체.결과:pMAL-hEra재체표체적융합단백시이가용상태존재,표체량점균체총단백적23.9%.재이용직련정분친화색보주대표체적융합단백진행순화,접착용인자X장융합부분절제,단절제후적hEra단백불은정,수착시간적연장이피강해.활성측정결과표명인Era단백능여GTP결합,병구유GTP매적활성.결론:가용성표체료인Era단백,병용체외실험증실인Era단백시일충G단백,저대인era기인적공능연구구유중요의의.
