中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2010年
33期
6108-6112
,共5页
佟俊杰%袁晓%张月%马宁%张广耘
佟俊傑%袁曉%張月%馬寧%張廣耘
동준걸%원효%장월%마저%장엄운
张应力%凋亡%半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3%细胞周期%成纤维细胞
張應力%凋亡%半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3%細胞週期%成纖維細胞
장응력%조망%반광안산천동안산단백매3%세포주기%성섬유세포
背景:在体内条件下,细胞力学的功能研究因其所处生理环境的复杂性、实验条件的不易控制而很难得到满意结果.目的:探讨周期性张应力对成纤维细胞凋亡的作用及影响机制.方法:采用多通道细胞牵张应力加载系统,以成纤维细胞为对象构建细胞体外培养-力学刺激模型.加力组成纤维细胞分别给予周期性张应力刺激6,12,24 h,力值定为12%surface elongation,频率为6 cycles/min,每一循环包括3 s stretch/3 s relaxation,并设立正常对照组.采用Hoechst33258染色检测细胞凋亡情况,以流式细胞仪分析细胞周期,应用酶标仪测定半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的活性.结果与结论:正常对照组细胞核为弥散均匀的圆形或椭圆形荧光,加力组细胞核或细胞质内可见致密浓染的颗粒、新月体或环状荧光.与正常对照组比较,加力组细胞周期显著延长(P<0.01);与加力6 h组比较,加力12,24 h组细胞周期均显著缩短(P<0.01),而加力24 h组细胞周期略长于加力12 h组.与正常对照组比较,加力组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性均显著升高(P<0.01);加力12 h组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3活性显著高于加力6 h组(P<0.01).表明周期性张应力可以诱导成纤维细胞凋亡,在12 h内加力时间越长,早期凋亡越明显,且能够改变其细胞周期,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3参与了此过程.
揹景:在體內條件下,細胞力學的功能研究因其所處生理環境的複雜性、實驗條件的不易控製而很難得到滿意結果.目的:探討週期性張應力對成纖維細胞凋亡的作用及影響機製.方法:採用多通道細胞牽張應力加載繫統,以成纖維細胞為對象構建細胞體外培養-力學刺激模型.加力組成纖維細胞分彆給予週期性張應力刺激6,12,24 h,力值定為12%surface elongation,頻率為6 cycles/min,每一循環包括3 s stretch/3 s relaxation,併設立正常對照組.採用Hoechst33258染色檢測細胞凋亡情況,以流式細胞儀分析細胞週期,應用酶標儀測定半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3的活性.結果與結論:正常對照組細胞覈為瀰散均勻的圓形或橢圓形熒光,加力組細胞覈或細胞質內可見緻密濃染的顆粒、新月體或環狀熒光.與正常對照組比較,加力組細胞週期顯著延長(P<0.01);與加力6 h組比較,加力12,24 h組細胞週期均顯著縮短(P<0.01),而加力24 h組細胞週期略長于加力12 h組.與正常對照組比較,加力組細胞半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3活性均顯著升高(P<0.01);加力12 h組細胞半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3活性顯著高于加力6 h組(P<0.01).錶明週期性張應力可以誘導成纖維細胞凋亡,在12 h內加力時間越長,早期凋亡越明顯,且能夠改變其細胞週期,半胱氨痠天鼕氨痠蛋白酶3參與瞭此過程.
배경:재체내조건하,세포역학적공능연구인기소처생리배경적복잡성、실험조건적불역공제이흔난득도만의결과.목적:탐토주기성장응력대성섬유세포조망적작용급영향궤제.방법:채용다통도세포견장응력가재계통,이성섬유세포위대상구건세포체외배양-역학자격모형.가력조성섬유세포분별급여주기성장응력자격6,12,24 h,력치정위12%surface elongation,빈솔위6 cycles/min,매일순배포괄3 s stretch/3 s relaxation,병설립정상대조조.채용Hoechst33258염색검측세포조망정황,이류식세포의분석세포주기,응용매표의측정반광안산천동안산단백매3적활성.결과여결론:정상대조조세포핵위미산균균적원형혹타원형형광,가력조세포핵혹세포질내가견치밀농염적과립、신월체혹배상형광.여정상대조조비교,가력조세포주기현저연장(P<0.01);여가력6 h조비교,가력12,24 h조세포주기균현저축단(P<0.01),이가력24 h조세포주기략장우가력12 h조.여정상대조조비교,가력조세포반광안산천동안산단백매3활성균현저승고(P<0.01);가력12 h조세포반광안산천동안산단백매3활성현저고우가력6 h조(P<0.01).표명주기성장응력가이유도성섬유세포조망,재12 h내가력시간월장,조기조망월명현,차능구개변기세포주기,반광안산천동안산단백매3삼여료차과정.