中国骨质疏松杂志
中國骨質疏鬆雜誌
중국골질소송잡지
CHINESE JOURNAL OF OSTEOPOROSIS
2011年
6期
477-483
,共7页
陶可%曾晖%熊奡%唐新宇%张勇%康斌%辛风%桂先革
陶可%曾暉%熊奡%唐新宇%張勇%康斌%辛風%桂先革
도가%증휘%웅오%당신우%장용%강빈%신풍%계선혁
IL-6R抗体%聚甲基丙烯酸甲酯%骨水泥%滑膜成纤维细胞%基质金属蛋白酶-1%基质金属蛋白酶-3%血管内皮生长因子%血小板衍生生长因子
IL-6R抗體%聚甲基丙烯痠甲酯%骨水泥%滑膜成纖維細胞%基質金屬蛋白酶-1%基質金屬蛋白酶-3%血管內皮生長因子%血小闆衍生生長因子
IL-6R항체%취갑기병희산갑지%골수니%활막성섬유세포%기질금속단백매-1%기질금속단백매-3%혈관내피생장인자%혈소판연생생장인자
目的 探讨IL-6R抗体对PMMA骨水泥介导的滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA表达的调节.方法 从全髋关节置换术中获取滑膜组织消化并传代培养.倒置相差显微镜对滑膜细胞进行形态学观察,免疫细胞化学(SABC法)染色对滑膜成纤维细胞进行鉴定.根据加入不同培养物,实验分为3组:PMMA组:75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;IL-6R抗体组:10 ng/mL IL6R抗体+75μg/mL PMMA骨水泥颗粒;空白对照组.采用细胞计数试剂盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)检测IL-6R抗体、PMMA对滑膜成纤维细胞增殖活力影响;实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)检测MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 表达.结果 原代滑膜细胞贴壁后,初期为短梭形.连续3次传代后,95%以上细胞为长梭形成纤维细胞样细胞.SABC法染色检测结果显示:上述成纤维样细胞抗CD68抗体阴性,抗vimentin抗体呈棕黄色,为阳性反应.CCK-8检测显示:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组吸光度(A)值明显降低(P<0.01);而空白对照组与PMMA组间吸光度(A)值无统计学差异(P>0.05).FQ-PCR 检测发现:与PMMA组和空白对照组相比,IL-6R抗体组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 的表达明显受到抑制(P<0.01);PMMA组中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF表达较空白对照组升高(P<0.05).结论 IL-6R抗体能显著抑制滑膜成纤维细胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA的表达,为生物制剂预防和治疗假体无菌性松动提供分子生物学的理论依据.
目的 探討IL-6R抗體對PMMA骨水泥介導的滑膜成纖維細胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA錶達的調節.方法 從全髖關節置換術中穫取滑膜組織消化併傳代培養.倒置相差顯微鏡對滑膜細胞進行形態學觀察,免疫細胞化學(SABC法)染色對滑膜成纖維細胞進行鑒定.根據加入不同培養物,實驗分為3組:PMMA組:75μg/mL PMMA骨水泥顆粒;IL-6R抗體組:10 ng/mL IL6R抗體+75μg/mL PMMA骨水泥顆粒;空白對照組.採用細胞計數試劑盒-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)檢測IL-6R抗體、PMMA對滑膜成纖維細胞增殖活力影響;實時熒光定量PCR(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)檢測MMP-1、MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 錶達.結果 原代滑膜細胞貼壁後,初期為短梭形.連續3次傳代後,95%以上細胞為長梭形成纖維細胞樣細胞.SABC法染色檢測結果顯示:上述成纖維樣細胞抗CD68抗體陰性,抗vimentin抗體呈棕黃色,為暘性反應.CCK-8檢測顯示:與PMMA組和空白對照組相比,IL-6R抗體組吸光度(A)值明顯降低(P<0.01);而空白對照組與PMMA組間吸光度(A)值無統計學差異(P>0.05).FQ-PCR 檢測髮現:與PMMA組和空白對照組相比,IL-6R抗體組中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA 的錶達明顯受到抑製(P<0.01);PMMA組中MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF錶達較空白對照組升高(P<0.05).結論 IL-6R抗體能顯著抑製滑膜成纖維細胞MMP-1和MMP-3、VEGF和PDGF mRNA的錶達,為生物製劑預防和治療假體無菌性鬆動提供分子生物學的理論依據.
목적 탐토IL-6R항체대PMMA골수니개도적활막성섬유세포MMP-1화MMP-3、VEGF화PDGF mRNA표체적조절.방법 종전관관절치환술중획취활막조직소화병전대배양.도치상차현미경대활막세포진행형태학관찰,면역세포화학(SABC법)염색대활막성섬유세포진행감정.근거가입불동배양물,실험분위3조:PMMA조:75μg/mL PMMA골수니과립;IL-6R항체조:10 ng/mL IL6R항체+75μg/mL PMMA골수니과립;공백대조조.채용세포계수시제합-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)검측IL-6R항체、PMMA대활막성섬유세포증식활력영향;실시형광정량PCR(real time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)검측MMP-1、MMP-3、VEGF화PDGF mRNA 표체.결과 원대활막세포첩벽후,초기위단사형.련속3차전대후,95%이상세포위장사형성섬유세포양세포.SABC법염색검측결과현시:상술성섬유양세포항CD68항체음성,항vimentin항체정종황색,위양성반응.CCK-8검측현시:여PMMA조화공백대조조상비,IL-6R항체조흡광도(A)치명현강저(P<0.01);이공백대조조여PMMA조간흡광도(A)치무통계학차이(P>0.05).FQ-PCR 검측발현:여PMMA조화공백대조조상비,IL-6R항체조중MMP-1화MMP-3、VEGF화PDGF mRNA 적표체명현수도억제(P<0.01);PMMA조중MMP-1화MMP-3、VEGF화PDGF표체교공백대조조승고(P<0.05).결론 IL-6R항체능현저억제활막성섬유세포MMP-1화MMP-3、VEGF화PDGF mRNA적표체,위생물제제예방화치료가체무균성송동제공분자생물학적이론의거.
