华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2011年
6期
97-101
,共5页
张国裕%张帆%姜立纲%翟伟卜%李海真
張國裕%張帆%薑立綱%翟偉蔔%李海真
장국유%장범%강립강%적위복%리해진
南瓜%EST-SSR%标记开发%杂种纯度
南瓜%EST-SSR%標記開髮%雜種純度
남과%EST-SSR%표기개발%잡충순도
为利用SSR标记进行快速、准确的南瓜杂交种纯度分析,进行了南瓜EST-SSR标记的开发.从NCBI数据库下载1 457条南瓜属作物EST序列,去除冗余序列后进行SSR位点搜索,共得到215条含有SSR位点的EST序列.这些SSR位点包含111种重复基元,其中二核苷酸(62个,占28.84%)和三核苷酸(86个,占40.0%)重复类型占主导地位;重复基元中出现最多的是CT(21个,占9.77%),其次为TC(13个,占6.05%)和AAG(12个,占5.58%).将215个SSR位点设计成EST-SSR引物后,随机合成了其中的43对引物.利用4份遗传背景差异较大的南瓜自交系对合成的43对引物进行扩增效果评价,其中28对引物有稳定清晰的扩增产物,占合成引物的65.12%.利用这些有效扩增引物对南瓜属作物商品杂交种进行纯度检测,共获得13个杂交组合的特异性检测引物,F1杂交种的纯度在79.2%~ 100.0%,与田间检测结果相符.结果表明,利用南瓜EST序列开发SSR引物具有简单快速、成本低和适用性好的特点.
為利用SSR標記進行快速、準確的南瓜雜交種純度分析,進行瞭南瓜EST-SSR標記的開髮.從NCBI數據庫下載1 457條南瓜屬作物EST序列,去除冗餘序列後進行SSR位點搜索,共得到215條含有SSR位點的EST序列.這些SSR位點包含111種重複基元,其中二覈苷痠(62箇,佔28.84%)和三覈苷痠(86箇,佔40.0%)重複類型佔主導地位;重複基元中齣現最多的是CT(21箇,佔9.77%),其次為TC(13箇,佔6.05%)和AAG(12箇,佔5.58%).將215箇SSR位點設計成EST-SSR引物後,隨機閤成瞭其中的43對引物.利用4份遺傳揹景差異較大的南瓜自交繫對閤成的43對引物進行擴增效果評價,其中28對引物有穩定清晰的擴增產物,佔閤成引物的65.12%.利用這些有效擴增引物對南瓜屬作物商品雜交種進行純度檢測,共穫得13箇雜交組閤的特異性檢測引物,F1雜交種的純度在79.2%~ 100.0%,與田間檢測結果相符.結果錶明,利用南瓜EST序列開髮SSR引物具有簡單快速、成本低和適用性好的特點.
위이용SSR표기진행쾌속、준학적남과잡교충순도분석,진행료남과EST-SSR표기적개발.종NCBI수거고하재1 457조남과속작물EST서렬,거제용여서렬후진행SSR위점수색,공득도215조함유SSR위점적EST서렬.저사SSR위점포함111충중복기원,기중이핵감산(62개,점28.84%)화삼핵감산(86개,점40.0%)중복류형점주도지위;중복기원중출현최다적시CT(21개,점9.77%),기차위TC(13개,점6.05%)화AAG(12개,점5.58%).장215개SSR위점설계성EST-SSR인물후,수궤합성료기중적43대인물.이용4빈유전배경차이교대적남과자교계대합성적43대인물진행확증효과평개,기중28대인물유은정청석적확증산물,점합성인물적65.12%.이용저사유효확증인물대남과속작물상품잡교충진행순도검측,공획득13개잡교조합적특이성검측인물,F1잡교충적순도재79.2%~ 100.0%,여전간검측결과상부.결과표명,이용남과EST서렬개발SSR인물구유간단쾌속、성본저화괄용성호적특점.