广东农业科学
廣東農業科學
엄동농업과학
GUANGDONG AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
10期
151-154
,共4页
粉红粘帚霉%几丁质酶基因%原生质体转化%转化子%生物学特性%生物防治
粉紅粘帚黴%幾丁質酶基因%原生質體轉化%轉化子%生物學特性%生物防治
분홍점추매%궤정질매기인%원생질체전화%전화자%생물학특성%생물방치
通过原生质体转化法,制备粉红粘帚霉67-1转几丁质酶基因的转化子,通过潮霉素抗性平板初筛及PCR复筛,共获得530个转化子.对其生物学性状测定表明,3株转化子产孢量明显增加,3株转化子生长量显著提高.比色法测定发现40%的转化子几丁质酶活高于野生型菌株,对峙试验发现25%的转化子抑菌效果明显提高.初步筛选出生长快速、产孢量多、几丁质酶高、对菌核抑制效果明显的转化菌株TC-8 、TC-64、TC-298、TC-406、TC-514,对其进行抗大豆菌核病防效试验测定,结果表明TC-8、TC-64 、TC-298转化子防病效果明显优于67-1原始菌株和化学农药,通过实时荧光定量PCR验证,发现此3株工程菌株几丁质酶表达量明显增加.
通過原生質體轉化法,製備粉紅粘帚黴67-1轉幾丁質酶基因的轉化子,通過潮黴素抗性平闆初篩及PCR複篩,共穫得530箇轉化子.對其生物學性狀測定錶明,3株轉化子產孢量明顯增加,3株轉化子生長量顯著提高.比色法測定髮現40%的轉化子幾丁質酶活高于野生型菌株,對峙試驗髮現25%的轉化子抑菌效果明顯提高.初步篩選齣生長快速、產孢量多、幾丁質酶高、對菌覈抑製效果明顯的轉化菌株TC-8 、TC-64、TC-298、TC-406、TC-514,對其進行抗大豆菌覈病防效試驗測定,結果錶明TC-8、TC-64 、TC-298轉化子防病效果明顯優于67-1原始菌株和化學農藥,通過實時熒光定量PCR驗證,髮現此3株工程菌株幾丁質酶錶達量明顯增加.
통과원생질체전화법,제비분홍점추매67-1전궤정질매기인적전화자,통과조매소항성평판초사급PCR복사,공획득530개전화자.대기생물학성상측정표명,3주전화자산포량명현증가,3주전화자생장량현저제고.비색법측정발현40%적전화자궤정질매활고우야생형균주,대치시험발현25%적전화자억균효과명현제고.초보사선출생장쾌속、산포량다、궤정질매고、대균핵억제효과명현적전화균주TC-8 、TC-64、TC-298、TC-406、TC-514,대기진행항대두균핵병방효시험측정,결과표명TC-8、TC-64 、TC-298전화자방병효과명현우우67-1원시균주화화학농약,통과실시형광정량PCR험증,발현차3주공정균주궤정질매표체량명현증가.