草业学报
草業學報
초업학보
PRATACULTURAL SCIENCE
2012年
2期
123-132
,共10页
董洁%王学敏%王赞%高洪文%孙桂枝
董潔%王學敏%王讚%高洪文%孫桂枝
동길%왕학민%왕찬%고홍문%손계지
紫花苜蓿%二氢黄酮醇还原酶基因%实时荧光定量PCR
紫花苜蓿%二氫黃酮醇還原酶基因%實時熒光定量PCR
자화목숙%이경황동순환원매기인%실시형광정량PCR
二氢黄酮醇还原酶(dihydroflavonol reductase,DFR)是缩合单宁生物合成途径中的关键酶,在单宁的合成中起着重要的作用.根据同源克隆的原理,利用RACE技术,从“中苜一号”苜蓿中克隆得到DFR基因(MsDFR),并对其进行了序列分析及不同胁迫条件下的表达模式分析.结果表明,MsDFR基因cDNA全长1 402 bp,包括开放阅读框1 023 bp,编码340个氨基酸,在N端存在1个NADP结合位点“VTGASGFIGSWLVMRLMERGY”,中部存在1个底物特异性结合的氨基酸基序“TLNVTEDQKPLWDESCWSDVEFCRRV”.实时荧光定量PCR结果表明,该基因在荚果中表达量较高,根中较弱;在NaC1和GA3诱导下,MsDFR基因表达受到抑制;在黑暗条件下,该基因被诱导表达.由此推测“中苜一号”苜蓿中可能存在不依赖于GA3信号的单宁合成途径.
二氫黃酮醇還原酶(dihydroflavonol reductase,DFR)是縮閤單寧生物閤成途徑中的關鍵酶,在單寧的閤成中起著重要的作用.根據同源剋隆的原理,利用RACE技術,從“中苜一號”苜蓿中剋隆得到DFR基因(MsDFR),併對其進行瞭序列分析及不同脅迫條件下的錶達模式分析.結果錶明,MsDFR基因cDNA全長1 402 bp,包括開放閱讀框1 023 bp,編碼340箇氨基痠,在N耑存在1箇NADP結閤位點“VTGASGFIGSWLVMRLMERGY”,中部存在1箇底物特異性結閤的氨基痠基序“TLNVTEDQKPLWDESCWSDVEFCRRV”.實時熒光定量PCR結果錶明,該基因在莢果中錶達量較高,根中較弱;在NaC1和GA3誘導下,MsDFR基因錶達受到抑製;在黑暗條件下,該基因被誘導錶達.由此推測“中苜一號”苜蓿中可能存在不依賴于GA3信號的單寧閤成途徑.
이경황동순환원매(dihydroflavonol reductase,DFR)시축합단저생물합성도경중적관건매,재단저적합성중기착중요적작용.근거동원극륭적원리,이용RACE기술,종“중목일호”목숙중극륭득도DFR기인(MsDFR),병대기진행료서렬분석급불동협박조건하적표체모식분석.결과표명,MsDFR기인cDNA전장1 402 bp,포괄개방열독광1 023 bp,편마340개안기산,재N단존재1개NADP결합위점“VTGASGFIGSWLVMRLMERGY”,중부존재1개저물특이성결합적안기산기서“TLNVTEDQKPLWDESCWSDVEFCRRV”.실시형광정량PCR결과표명,해기인재협과중표체량교고,근중교약;재NaC1화GA3유도하,MsDFR기인표체수도억제;재흑암조건하,해기인피유도표체.유차추측“중목일호”목숙중가능존재불의뢰우GA3신호적단저합성도경.