国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2012年
16期
1990-1992
,共3页
孟璐璐%王琳琳%窦亚玲%刘菊芬%靳蕾%任爱国
孟璐璐%王琳琳%竇亞玲%劉菊芬%靳蕾%任愛國
맹로로%왕림림%두아령%류국분%근뢰%임애국
巨细胞病毒%聚合酶链反应%DNA,病毒
巨細胞病毒%聚閤酶鏈反應%DNA,病毒
거세포병독%취합매련반응%DNA,병독
目的 建立巢式PCR检测滤纸血片标本巨细胞病毒核酸(CMV DNA) 的实验方法,并对其灵敏度、最低检测限、稳定性等进行评价.方法 采集医院确诊CMV阳性的血液样品,分别制备成全血和滤纸血片标本.选取5份滤纸血片标本,分别打取3个或6个直径3 mm的圆片用于DNA提取,并对所得DNA溶液的浓度和纯度进行测定.采用巢式PCR对12份滤纸血片和全血标本进行检测,获得该方法的灵敏度和最低检测限数据.将滤纸血片标本储存于-20 ℃ 3个月后重新进行检测,以判断巢式PCR方法的稳定性.结果 将DNA提取时所用圆片数由3个增加到6个后,DNA溶液浓度提高2～8倍,巢式PCR的灵敏度升高;与全血检测结果相比,巢式PCR检测滤纸血片标本CMV DNA方法的灵敏度为100%,最低检测限为75 copy/mL.滤纸血片标本在-20 ℃放置3个月,实验的灵敏度未下降.结论 使用巢式PCR检测滤纸血片标本CMV DNA能够获得准确、可靠、稳定的结果.与3个圆片相比,使用6个圆片进行滤纸血片标本DNA的提取,可使DNA溶液浓度大大增加,因而有助于提高检测的灵敏度.
目的 建立巢式PCR檢測濾紙血片標本巨細胞病毒覈痠(CMV DNA) 的實驗方法,併對其靈敏度、最低檢測限、穩定性等進行評價.方法 採集醫院確診CMV暘性的血液樣品,分彆製備成全血和濾紙血片標本.選取5份濾紙血片標本,分彆打取3箇或6箇直徑3 mm的圓片用于DNA提取,併對所得DNA溶液的濃度和純度進行測定.採用巢式PCR對12份濾紙血片和全血標本進行檢測,穫得該方法的靈敏度和最低檢測限數據.將濾紙血片標本儲存于-20 ℃ 3箇月後重新進行檢測,以判斷巢式PCR方法的穩定性.結果 將DNA提取時所用圓片數由3箇增加到6箇後,DNA溶液濃度提高2～8倍,巢式PCR的靈敏度升高;與全血檢測結果相比,巢式PCR檢測濾紙血片標本CMV DNA方法的靈敏度為100%,最低檢測限為75 copy/mL.濾紙血片標本在-20 ℃放置3箇月,實驗的靈敏度未下降.結論 使用巢式PCR檢測濾紙血片標本CMV DNA能夠穫得準確、可靠、穩定的結果.與3箇圓片相比,使用6箇圓片進行濾紙血片標本DNA的提取,可使DNA溶液濃度大大增加,因而有助于提高檢測的靈敏度.
목적 건립소식PCR검측려지혈편표본거세포병독핵산(CMV DNA) 적실험방법,병대기령민도、최저검측한、은정성등진행평개.방법 채집의원학진CMV양성적혈액양품,분별제비성전혈화려지혈편표본.선취5빈려지혈편표본,분별타취3개혹6개직경3 mm적원편용우DNA제취,병대소득DNA용액적농도화순도진행측정.채용소식PCR대12빈려지혈편화전혈표본진행검측,획득해방법적령민도화최저검측한수거.장려지혈편표본저존우-20 ℃ 3개월후중신진행검측,이판단소식PCR방법적은정성.결과 장DNA제취시소용원편수유3개증가도6개후,DNA용액농도제고2～8배,소식PCR적령민도승고;여전혈검측결과상비,소식PCR검측려지혈편표본CMV DNA방법적령민도위100%,최저검측한위75 copy/mL.려지혈편표본재-20 ℃방치3개월,실험적령민도미하강.결론 사용소식PCR검측려지혈편표본CMV DNA능구획득준학、가고、은정적결과.여3개원편상비,사용6개원편진행려지혈편표본DNA적제취,가사DNA용액농도대대증가,인이유조우제고검측적령민도.
