山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2012年
29期
10-13
,共4页
赵琳%刘朝奇%李志英%鲁选文
趙琳%劉朝奇%李誌英%魯選文
조림%류조기%리지영%로선문
宫颈肿瘤%乳头状瘤病毒,人%siRNA表达载体%顺铂
宮頸腫瘤%乳頭狀瘤病毒,人%siRNA錶達載體%順鉑
궁경종류%유두상류병독,인%siRNA표체재체%순박
目的 探讨人乳头瘤病毒16型(HPV16) E7基因小干扰RNA(siRNA)表达载体对宫颈癌CaSki细胞生物学活性的影响.方法 利用脂质体HPV16 E7特异性siRNA表达载体(HPV16-E7Si)、空载体(CaSki-Si)转染CaSki细胞,荧光定量RT-PCR、流式细胞仪检测HPV16-E7Si、CaSki-Si细胞E7 mRNA和蛋白的变化；流式细胞仪及MTT法检测2种细胞的细胞周期及生长曲线变化,并检测2种细胞对顺铂的敏感性.结果 成功获得沉默E7基因的克隆细胞株CaSki-E7Si及阴性对照CaSki-Si；CaSki-E7Si细胞生长明显慢于CaSki-Si细胞(P＜0.05),且前者细胞的凋亡峰明显增多.2种细胞加用顺铂作用48 h后发现,CaSki-Si细胞周期阻滞在S～ G2期,HPV16-E7Si阻滞在G0～1期.结论 HPV16 E7 siRNA表达载体能有效地抑制宫颈癌CaSki细胞E7基因的表达,促进肿瘤细胞凋亡,并增加顺铂的敏感性.
目的 探討人乳頭瘤病毒16型(HPV16) E7基因小榦擾RNA(siRNA)錶達載體對宮頸癌CaSki細胞生物學活性的影響.方法 利用脂質體HPV16 E7特異性siRNA錶達載體(HPV16-E7Si)、空載體(CaSki-Si)轉染CaSki細胞,熒光定量RT-PCR、流式細胞儀檢測HPV16-E7Si、CaSki-Si細胞E7 mRNA和蛋白的變化；流式細胞儀及MTT法檢測2種細胞的細胞週期及生長麯線變化,併檢測2種細胞對順鉑的敏感性.結果 成功穫得沉默E7基因的剋隆細胞株CaSki-E7Si及陰性對照CaSki-Si；CaSki-E7Si細胞生長明顯慢于CaSki-Si細胞(P＜0.05),且前者細胞的凋亡峰明顯增多.2種細胞加用順鉑作用48 h後髮現,CaSki-Si細胞週期阻滯在S～ G2期,HPV16-E7Si阻滯在G0～1期.結論 HPV16 E7 siRNA錶達載體能有效地抑製宮頸癌CaSki細胞E7基因的錶達,促進腫瘤細胞凋亡,併增加順鉑的敏感性.
목적 탐토인유두류병독16형(HPV16) E7기인소간우RNA(siRNA)표체재체대궁경암CaSki세포생물학활성적영향.방법 이용지질체HPV16 E7특이성siRNA표체재체(HPV16-E7Si)、공재체(CaSki-Si)전염CaSki세포,형광정량RT-PCR、류식세포의검측HPV16-E7Si、CaSki-Si세포E7 mRNA화단백적변화；류식세포의급MTT법검측2충세포적세포주기급생장곡선변화,병검측2충세포대순박적민감성.결과 성공획득침묵E7기인적극륭세포주CaSki-E7Si급음성대조CaSki-Si；CaSki-E7Si세포생장명현만우CaSki-Si세포(P＜0.05),차전자세포적조망봉명현증다.2충세포가용순박작용48 h후발현,CaSki-Si세포주기조체재S～ G2기,HPV16-E7Si조체재G0～1기.결론 HPV16 E7 siRNA표체재체능유효지억제궁경암CaSki세포E7기인적표체,촉진종류세포조망,병증가순박적민감성.
