中华普通外科杂志
中華普通外科雜誌
중화보통외과잡지
CHINESE JOURNAL OF GENERAL SURGERY
2005年
12期
790-792
,共3页
田井琦%白日星%张海燕%李卫红%孙立波%介建政%张德恒
田井琦%白日星%張海燕%李衛紅%孫立波%介建政%張德恆
전정기%백일성%장해연%리위홍%손립파%개건정%장덕항
胰腺%干细胞%胰岛%细胞培养
胰腺%榦細胞%胰島%細胞培養
이선%간세포%이도%세포배양
目的探索新生大鼠胰腺nestin阳性细胞体外分离、培养并使之形成类胰岛样细胞团的方法.方法应用胶原酶消化新生大鼠胰腺,将消化的组织碎片培养形成类胰岛样细胞团后传代.免疫荧光细胞化学法检测贴壁细胞胰岛素、胰高血糖素及nestin的表达.RT-PCR检测培养1周的贴壁细胞nestin及细胞角蛋白(CK19)的表达.结果在pH 7.6条件下培养24～36 h有部分细胞贴壁生长,改用pH 7.4无血清RPMI 1640培养液培养18～24d可形成类胰岛样细胞团,传代后可有单层细胞生长.培养24～36 h的贴壁细胞nestin呈阳性,但胰岛素、胰高血糖素阴性,形成的类胰岛样细胞团传代后24 h胰岛素、胰高血糖素呈阳性.培养1周的单层细胞经RT-PCR扩增获得nestin片段,但未获得CK19相应的片段.结论类胰岛样细胞团传代培养后可表达胰岛素、胰高血糖素;胰腺nestin阳性细胞具有胰岛干细胞的特点.
目的探索新生大鼠胰腺nestin暘性細胞體外分離、培養併使之形成類胰島樣細胞糰的方法.方法應用膠原酶消化新生大鼠胰腺,將消化的組織碎片培養形成類胰島樣細胞糰後傳代.免疫熒光細胞化學法檢測貼壁細胞胰島素、胰高血糖素及nestin的錶達.RT-PCR檢測培養1週的貼壁細胞nestin及細胞角蛋白(CK19)的錶達.結果在pH 7.6條件下培養24～36 h有部分細胞貼壁生長,改用pH 7.4無血清RPMI 1640培養液培養18～24d可形成類胰島樣細胞糰,傳代後可有單層細胞生長.培養24～36 h的貼壁細胞nestin呈暘性,但胰島素、胰高血糖素陰性,形成的類胰島樣細胞糰傳代後24 h胰島素、胰高血糖素呈暘性.培養1週的單層細胞經RT-PCR擴增穫得nestin片段,但未穫得CK19相應的片段.結論類胰島樣細胞糰傳代培養後可錶達胰島素、胰高血糖素;胰腺nestin暘性細胞具有胰島榦細胞的特點.
목적탐색신생대서이선nestin양성세포체외분리、배양병사지형성류이도양세포단적방법.방법응용효원매소화신생대서이선,장소화적조직쇄편배양형성류이도양세포단후전대.면역형광세포화학법검측첩벽세포이도소、이고혈당소급nestin적표체.RT-PCR검측배양1주적첩벽세포nestin급세포각단백(CK19)적표체.결과재pH 7.6조건하배양24～36 h유부분세포첩벽생장,개용pH 7.4무혈청RPMI 1640배양액배양18～24d가형성류이도양세포단,전대후가유단층세포생장.배양24～36 h적첩벽세포nestin정양성,단이도소、이고혈당소음성,형성적류이도양세포단전대후24 h이도소、이고혈당소정양성.배양1주적단층세포경RT-PCR확증획득nestin편단,단미획득CK19상응적편단.결론류이도양세포단전대배양후가표체이도소、이고혈당소;이선nestin양성세포구유이도간세포적특점.
