CAJ | 학술논문

将CFA/Ⅰ结构基因(cfaABCE)克隆到载体pJRD184上构建了质粒pJGX15A,并将其转入大肠杆菌topA野生株E.coli HB101和topA缺陷株E.coli DM800中.Western blot测定的结果表明,在CFA/Ⅰ的正调控基因cfaD基因缺失时,两株重组菌株都能够表达CFA/Ⅰ抗原.分别抽提两个重组菌株对数前期和对数中期的质粒pJGX15A DNA,并对其进行氯喹琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示E.coli DM800细胞中质粒pJGX15A的负超螺旋水平比野生型细胞E.coli HB101中的较低.同时,菌落免疫酶斑分析的结果显示DM800受体菌中CFA/Ⅰ的表达水平比HB101受体菌中的表达水平高.实验结果表明,CFA/Ⅰ结构基因的表达与DNA负超螺旋水平有明显的负相关性,与负超螺旋促进基因表达的看法不同.
장CFA/Ⅰ결구기인(cfaABCE)극륭도재체pJRD184상구건료질립pJGX15A,병장기전입대장간균topA야생주E.coli HB101화topA결함주E.coli DM800중.Western blot측정적결과표명,재CFA/Ⅰ적정조공기인cfaD기인결실시,량주중조균주도능구표체CFA/Ⅰ항원.분별추제량개중조균주대수전기화대수중기적질립pJGX15A DNA,병대기진행록규경지당응효전영분석,결과현시E.coli DM800세포중질립pJGX15A적부초라선수평비야생형세포E.coli HB101중적교저.동시,균락면역매반분석적결과현시DM800수체균중CFA/Ⅰ적표체수평비HB101수체균중적표체수평고.실험결과표명,CFA/Ⅰ결구기인적표체여DNA부초라선수평유명현적부상관성,여부초라선촉진기인표체적간법불동.