中国临床保健杂志
中國臨床保健雜誌
중국림상보건잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL HEALTHCARE
2008年
2期
175-177,插图2-1
,共4页
汤其强%梁秀龄%陈曦%徐评议
湯其彊%樑秀齡%陳晞%徐評議
탕기강%량수령%진희%서평의
肝豆状核变性%质粒%转染%基因疗法%铜%小鼠
肝豆狀覈變性%質粒%轉染%基因療法%銅%小鼠
간두상핵변성%질립%전염%기인요법%동%소서
目的 探索以重组真核表达质粒pcDNA3.0/ATP7B进行TX小鼠基因治疗的初步疗效.方法 以质粒和脂质体混合后进行尾静脉注射,分别给予TX小鼠pcDNA3.0/APT7B 0、10、20、50、100、150 μg,3d后测定其肝铜含量(ng/mg,即每mg干重的肝组织中铜的含量),确定合适的治疗剂量.然后随机选取36只TX小鼠,随机分成3组,即注射生理盐水组、注射pcDNA3.0组、注射pcDNA3.0/ATP7B组.进行肝脏组织RT PCR、Western blot检测和肝铜含量测定.结果 根据预实验结果,取pcDNA3.0/APT7B 100μg/只为治疗剂量.RT PCR和Western blot结果显示,加入pcDNA3.0/ATP7B组于加入后第3、7、14天均可见阳性条带.但以加入第3天时最明显.加入生理盐水组和加入pcDNA3.0质粒组均未见阳性条带.加入pcDNA3.0/APT7B组与生理盐水组及pcDNA3.0组比较,于加入第3、7天肝铜含量显著下降(P＜0.05),以第3天下降最明显.加入第14天肝铜含量无显著下降,P>0.05.结论 ATP7B基因重组真核表达质粒pcDNA3.0/ATP7B对TX小鼠的铜代谢有改善作用.
目的 探索以重組真覈錶達質粒pcDNA3.0/ATP7B進行TX小鼠基因治療的初步療效.方法 以質粒和脂質體混閤後進行尾靜脈註射,分彆給予TX小鼠pcDNA3.0/APT7B 0、10、20、50、100、150 μg,3d後測定其肝銅含量(ng/mg,即每mg榦重的肝組織中銅的含量),確定閤適的治療劑量.然後隨機選取36隻TX小鼠,隨機分成3組,即註射生理鹽水組、註射pcDNA3.0組、註射pcDNA3.0/ATP7B組.進行肝髒組織RT PCR、Western blot檢測和肝銅含量測定.結果 根據預實驗結果,取pcDNA3.0/APT7B 100μg/隻為治療劑量.RT PCR和Western blot結果顯示,加入pcDNA3.0/ATP7B組于加入後第3、7、14天均可見暘性條帶.但以加入第3天時最明顯.加入生理鹽水組和加入pcDNA3.0質粒組均未見暘性條帶.加入pcDNA3.0/APT7B組與生理鹽水組及pcDNA3.0組比較,于加入第3、7天肝銅含量顯著下降(P＜0.05),以第3天下降最明顯.加入第14天肝銅含量無顯著下降,P>0.05.結論 ATP7B基因重組真覈錶達質粒pcDNA3.0/ATP7B對TX小鼠的銅代謝有改善作用.
목적 탐색이중조진핵표체질립pcDNA3.0/ATP7B진행TX소서기인치료적초보료효.방법 이질립화지질체혼합후진행미정맥주사,분별급여TX소서pcDNA3.0/APT7B 0、10、20、50、100、150 μg,3d후측정기간동함량(ng/mg,즉매mg간중적간조직중동적함량),학정합괄적치료제량.연후수궤선취36지TX소서,수궤분성3조,즉주사생리염수조、주사pcDNA3.0조、주사pcDNA3.0/ATP7B조.진행간장조직RT PCR、Western blot검측화간동함량측정.결과 근거예실험결과,취pcDNA3.0/APT7B 100μg/지위치료제량.RT PCR화Western blot결과현시,가입pcDNA3.0/ATP7B조우가입후제3、7、14천균가견양성조대.단이가입제3천시최명현.가입생리염수조화가입pcDNA3.0질립조균미견양성조대.가입pcDNA3.0/APT7B조여생리염수조급pcDNA3.0조비교,우가입제3、7천간동함량현저하강(P＜0.05),이제3천하강최명현.가입제14천간동함량무현저하강,P>0.05.결론 ATP7B기인중조진핵표체질립pcDNA3.0/ATP7B대TX소서적동대사유개선작용.
