现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2008年
3期
66-68
,共3页
谢龙山%雷均平%余秀兰%张章%范联
謝龍山%雷均平%餘秀蘭%張章%範聯
사룡산%뢰균평%여수란%장장%범련
B型钠尿肽%酶免疫分析%心力衰竭
B型鈉尿肽%酶免疫分析%心力衰竭
B형납뇨태%매면역분석%심력쇠갈
目的 采用酶免疫分析技术,建立B型钠尿肽(BNP)酶联免疫吸附方法(ELISA).方法 使用纯化的对一抗(兔抗BNP抗体)特异的二抗(羊抗兔抗体)包被微孔板,然后再加入一抗.制成固相抗体.检测中往包被抗体的微孔中依次加入BNP抗原或检测样品、生物素化抗人BNP抗体、HRP标记IgG,经过彻底洗涤后加底物液(OPD)显色,用酶标仪在492nm波长下测定吸光度(A值),计算样品浓度.结果 该法测定BNP的灵敏度为15 pg/ml,批内和批间CV分别为5.3±1.3%和7.1±1.5%,平均回收率为95.9±1.4%,线性范围为25~4 000 pg/ml.该方法测定正常组(n=20)及心衰组(n=25)血浆BNP分别为56.8±25.9(0~132 pg/ml)及462.3±158.7(163.4~697.8 pg/ml),而免疫放射法测定值分别为59.3±27.2(0~140 pg/ml)及470.1±162.5(165.8~708.6 pg/ml),两种方法所测结果高度相关,相关系数r=0.92,P<0.01.结论 应用酶免疫技术初步建立测定BNP的ELISA法,检测范围宽,重复性好,具有较高灵敏性及特异性.
目的 採用酶免疫分析技術,建立B型鈉尿肽(BNP)酶聯免疫吸附方法(ELISA).方法 使用純化的對一抗(兔抗BNP抗體)特異的二抗(羊抗兔抗體)包被微孔闆,然後再加入一抗.製成固相抗體.檢測中往包被抗體的微孔中依次加入BNP抗原或檢測樣品、生物素化抗人BNP抗體、HRP標記IgG,經過徹底洗滌後加底物液(OPD)顯色,用酶標儀在492nm波長下測定吸光度(A值),計算樣品濃度.結果 該法測定BNP的靈敏度為15 pg/ml,批內和批間CV分彆為5.3±1.3%和7.1±1.5%,平均迴收率為95.9±1.4%,線性範圍為25~4 000 pg/ml.該方法測定正常組(n=20)及心衰組(n=25)血漿BNP分彆為56.8±25.9(0~132 pg/ml)及462.3±158.7(163.4~697.8 pg/ml),而免疫放射法測定值分彆為59.3±27.2(0~140 pg/ml)及470.1±162.5(165.8~708.6 pg/ml),兩種方法所測結果高度相關,相關繫數r=0.92,P<0.01.結論 應用酶免疫技術初步建立測定BNP的ELISA法,檢測範圍寬,重複性好,具有較高靈敏性及特異性.
목적 채용매면역분석기술,건립B형납뇨태(BNP)매련면역흡부방법(ELISA).방법 사용순화적대일항(토항BNP항체)특이적이항(양항토항체)포피미공판,연후재가입일항.제성고상항체.검측중왕포피항체적미공중의차가입BNP항원혹검측양품、생물소화항인BNP항체、HRP표기IgG,경과철저세조후가저물액(OPD)현색,용매표의재492nm파장하측정흡광도(A치),계산양품농도.결과 해법측정BNP적령민도위15 pg/ml,비내화비간CV분별위5.3±1.3%화7.1±1.5%,평균회수솔위95.9±1.4%,선성범위위25~4 000 pg/ml.해방법측정정상조(n=20)급심쇠조(n=25)혈장BNP분별위56.8±25.9(0~132 pg/ml)급462.3±158.7(163.4~697.8 pg/ml),이면역방사법측정치분별위59.3±27.2(0~140 pg/ml)급470.1±162.5(165.8~708.6 pg/ml),량충방법소측결과고도상관,상관계수r=0.92,P<0.01.결론 응용매면역기술초보건립측정BNP적ELISA법,검측범위관,중복성호,구유교고령민성급특이성.