生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2008年
7期
1268-1273
,共6页
白昌明%Chousheng Liu%王志刚%Xinzhuang Wang
白昌明%Chousheng Liu%王誌剛%Xinzhuang Wang
백창명%Chousheng Liu%왕지강%Xinzhuang Wang
绵羊类ES细胞%小鼠ES细胞条件培养基%knockout血清替代品%自我更新
綿羊類ES細胞%小鼠ES細胞條件培養基%knockout血清替代品%自我更新
면양류ES세포%소서ES세포조건배양기%knockout혈청체대품%자아경신
以小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,研究了用Knockout血清替代品(Knockout serum replacement,KSR)代替胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES cell)培养液中的胎牛血清(FBS)和向含KSR的基础培养液中添加40%的小鼠ES细胞条件培养液(ES cell conditioned medium,ESCCM)对绵羊类Es细胞分离、克隆效率的影响.发现使用含FBS的基础培养液最多可以把绵羊类ES细胞传至3代,而使用KSR和添加ESCCM能促进绵羊类ES细胞的分离和克隆.所获得的类ES细胞分别可稳定传至第5和8代.同时对类ES细胞进行核型分析、AKP染色及体外分化能力检测,证实所分离的类Es细胞符合ES细胞的主要特征.由此认为.与FBS相比KSR更加适于绵羊类Es细胞的分离与培养;而小鼠ES细胞在生长过程中可能分泌某些重要的细胞因子,从而达到促进绵羊ES细胞增值的作用.
以小鼠胚胎成纖維細胞(MEF)為飼養層,研究瞭用Knockout血清替代品(Knockout serum replacement,KSR)代替胚胎榦細胞(Embryonic stem cells,ES cell)培養液中的胎牛血清(FBS)和嚮含KSR的基礎培養液中添加40%的小鼠ES細胞條件培養液(ES cell conditioned medium,ESCCM)對綿羊類Es細胞分離、剋隆效率的影響.髮現使用含FBS的基礎培養液最多可以把綿羊類ES細胞傳至3代,而使用KSR和添加ESCCM能促進綿羊類ES細胞的分離和剋隆.所穫得的類ES細胞分彆可穩定傳至第5和8代.同時對類ES細胞進行覈型分析、AKP染色及體外分化能力檢測,證實所分離的類Es細胞符閤ES細胞的主要特徵.由此認為.與FBS相比KSR更加適于綿羊類Es細胞的分離與培養;而小鼠ES細胞在生長過程中可能分泌某些重要的細胞因子,從而達到促進綿羊ES細胞增值的作用.
이소서배태성섬유세포(MEF)위사양층,연구료용Knockout혈청체대품(Knockout serum replacement,KSR)대체배태간세포(Embryonic stem cells,ES cell)배양액중적태우혈청(FBS)화향함KSR적기출배양액중첨가40%적소서ES세포조건배양액(ES cell conditioned medium,ESCCM)대면양류Es세포분리、극륭효솔적영향.발현사용함FBS적기출배양액최다가이파면양류ES세포전지3대,이사용KSR화첨가ESCCM능촉진면양류ES세포적분리화극륭.소획득적류ES세포분별가은정전지제5화8대.동시대류ES세포진행핵형분석、AKP염색급체외분화능력검측,증실소분리적류Es세포부합ES세포적주요특정.유차인위.여FBS상비KSR경가괄우면양류Es세포적분리여배양;이소서ES세포재생장과정중가능분비모사중요적세포인자,종이체도촉진면양ES세포증치적작용.
