实用临床医药杂志
實用臨床醫藥雜誌
실용림상의약잡지
JOURNAL OF JIANGSU CLINICAL MEDICINE
2009年
13期
25-29
,共5页
陈群%王甦%刘凤君%唐红%赵连三
陳群%王甦%劉鳳君%唐紅%趙連三
진군%왕소%류봉군%당홍%조련삼
乙型肝炎病毒%非肝源细胞%核激素受体%肝细胞核因子3%转录与复制
乙型肝炎病毒%非肝源細胞%覈激素受體%肝細胞覈因子3%轉錄與複製
을형간염병독%비간원세포%핵격소수체%간세포핵인자3%전록여복제
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)在非肝源细胞复制体系,观察核激素受体等对HBV基因转录和复制的调控作用.方法 用复制型HBV重组质粒pHBV4.1与核激素受体HNF4、和RXRa/PPARa以及HNF3的表达质粒,分别共转染非肝源细胞株NIH3T3;用Northern吸印杂交检测HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA的转录情况,Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平.结果 复制型HBV重组质粒pHBV4.1在肝癌细胞中,能检测到3.5 kb HBV RNA转录产物和HBV DNA复制中间体;用pHBV4.1转染NIH3T3细胞后,在没有核激素受体表达质粒共转染时未能检出3.5 kb HBV RNA等转录产物,也无HBV DNA复制中间体;当用核激素受体HNF4和RXRa/PPARa共转染时,能够激活3.5 kb HBV RNA转录和HBV DNA复制,而HNF3未能激活HBV复制,但在核激素受体HNF4或RXRα/PPARα介导的病毒复制体系中,同时共转染HNF3时,均可见3.5 kb HBV mRNA的转录和HBV DNA复制水平下降.结论 利用核激素受体等成功地建立HBV在非肝源细胞中的转录与复制,且显示HNF4和RXRa/PPARa可支持HBV在非肝源细胞中转录与复制;HNF3抑制HBV肝特异性基因转录与复制.
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)在非肝源細胞複製體繫,觀察覈激素受體等對HBV基因轉錄和複製的調控作用.方法 用複製型HBV重組質粒pHBV4.1與覈激素受體HNF4、和RXRa/PPARa以及HNF3的錶達質粒,分彆共轉染非肝源細胞株NIH3T3;用Northern吸印雜交檢測HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA的轉錄情況,Southern吸印雜交檢測HBV DNA複製中間體水平.結果 複製型HBV重組質粒pHBV4.1在肝癌細胞中,能檢測到3.5 kb HBV RNA轉錄產物和HBV DNA複製中間體;用pHBV4.1轉染NIH3T3細胞後,在沒有覈激素受體錶達質粒共轉染時未能檢齣3.5 kb HBV RNA等轉錄產物,也無HBV DNA複製中間體;噹用覈激素受體HNF4和RXRa/PPARa共轉染時,能夠激活3.5 kb HBV RNA轉錄和HBV DNA複製,而HNF3未能激活HBV複製,但在覈激素受體HNF4或RXRα/PPARα介導的病毒複製體繫中,同時共轉染HNF3時,均可見3.5 kb HBV mRNA的轉錄和HBV DNA複製水平下降.結論 利用覈激素受體等成功地建立HBV在非肝源細胞中的轉錄與複製,且顯示HNF4和RXRa/PPARa可支持HBV在非肝源細胞中轉錄與複製;HNF3抑製HBV肝特異性基因轉錄與複製.
목적 건립을형간염병독(HBV)재비간원세포복제체계,관찰핵격소수체등대HBV기인전록화복제적조공작용.방법 용복제형HBV중조질립pHBV4.1여핵격소수체HNF4、화RXRa/PPARa이급HNF3적표체질립,분별공전염비간원세포주NIH3T3;용Northern흡인잡교검측HBV 3.5 kb、2.4/2.1 kb、0.7 kb mRNA적전록정황,Southern흡인잡교검측HBV DNA복제중간체수평.결과 복제형HBV중조질립pHBV4.1재간암세포중,능검측도3.5 kb HBV RNA전록산물화HBV DNA복제중간체;용pHBV4.1전염NIH3T3세포후,재몰유핵격소수체표체질립공전염시미능검출3.5 kb HBV RNA등전록산물,야무HBV DNA복제중간체;당용핵격소수체HNF4화RXRa/PPARa공전염시,능구격활3.5 kb HBV RNA전록화HBV DNA복제,이HNF3미능격활HBV복제,단재핵격소수체HNF4혹RXRα/PPARα개도적병독복제체계중,동시공전염HNF3시,균가견3.5 kb HBV mRNA적전록화HBV DNA복제수평하강.결론 이용핵격소수체등성공지건립HBV재비간원세포중적전록여복제,차현시HNF4화RXRa/PPARa가지지HBV재비간원세포중전록여복제;HNF3억제HBV간특이성기인전록여복제.
