实验动物与比较医学
實驗動物與比較醫學
실험동물여비교의학
LABORATORY ANIMAL AND COMPARATIVE MEDICINE
2011年
1期
20-27
,共8页
孙爱静%黄狄来%茹国美%金立方
孫愛靜%黃狄來%茹國美%金立方
손애정%황적래%여국미%금립방
肝干/前体细胞%双分化潜能%无血清%细胞外基质
肝榦/前體細胞%雙分化潛能%無血清%細胞外基質
간간/전체세포%쌍분화잠능%무혈청%세포외기질
目的 建立猕猴肝上皮前体细胞的无血清体外培养体系.方法 取健康新生猕猴肝脏,剪切,消化、离心后在胶原培养体系中用含Ca<'2+>的培养基培养,选取多角形细胞集落,在不同胞外基质中分离培养,应用细胞免疫荧光染色、细胞化学染色、RT-PCR、靛青绿吸收染色方法进行细胞表型和双向分化潜能鉴定.结果 多角形细胞团块在层粘连蛋白或大鼠鼠尾胶原上增殖传代形成集落.并特异性地表达肝干细胞的特异性标志物,不表达成熟肝细胞标志.经地塞米松和抑瘤素诱导分化后表达成熟肝细胞的标志特征,在小鼠胎儿成纤维饲养层,表达胆管细胞的特异性标志蛋白并形成胆管样结构.结论 利用无血清培养体系从新生猕猴肝组织中分离到具有肝前体细胞特性的多角上皮细胞,这一研究模型的建立可为人类肝脏疾病的研究和细胞治疗提供临床前的评估平台.
目的 建立獼猴肝上皮前體細胞的無血清體外培養體繫.方法 取健康新生獼猴肝髒,剪切,消化、離心後在膠原培養體繫中用含Ca<'2+>的培養基培養,選取多角形細胞集落,在不同胞外基質中分離培養,應用細胞免疫熒光染色、細胞化學染色、RT-PCR、靛青綠吸收染色方法進行細胞錶型和雙嚮分化潛能鑒定.結果 多角形細胞糰塊在層粘連蛋白或大鼠鼠尾膠原上增殖傳代形成集落.併特異性地錶達肝榦細胞的特異性標誌物,不錶達成熟肝細胞標誌.經地塞米鬆和抑瘤素誘導分化後錶達成熟肝細胞的標誌特徵,在小鼠胎兒成纖維飼養層,錶達膽管細胞的特異性標誌蛋白併形成膽管樣結構.結論 利用無血清培養體繫從新生獼猴肝組織中分離到具有肝前體細胞特性的多角上皮細胞,這一研究模型的建立可為人類肝髒疾病的研究和細胞治療提供臨床前的評估平檯.
목적 건립미후간상피전체세포적무혈청체외배양체계.방법 취건강신생미후간장,전절,소화、리심후재효원배양체계중용함Ca<'2+>적배양기배양,선취다각형세포집락,재불동포외기질중분리배양,응용세포면역형광염색、세포화학염색、RT-PCR、전청록흡수염색방법진행세포표형화쌍향분화잠능감정.결과 다각형세포단괴재층점련단백혹대서서미효원상증식전대형성집락.병특이성지표체간간세포적특이성표지물,불표체성숙간세포표지.경지새미송화억류소유도분화후표체성숙간세포적표지특정,재소서태인성섬유사양층,표체담관세포적특이성표지단백병형성담관양결구.결론 이용무혈청배양체계종신생미후간조직중분리도구유간전체세포특성적다각상피세포,저일연구모형적건립가위인류간장질병적연구화세포치료제공림상전적평고평태.