华南农业大学学报
華南農業大學學報
화남농업대학학보
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2011年
1期
103-107
,共5页
焦晓军%黄显会%刘帅帅%谭清甜
焦曉軍%黃顯會%劉帥帥%譚清甜
초효군%황현회%류수수%담청첨
猪表皮生长因子%毕赤酵母%高密度发酵%纯化%生物活性
豬錶皮生長因子%畢赤酵母%高密度髮酵%純化%生物活性
저표피생장인자%필적효모%고밀도발효%순화%생물활성
采用高密度发酵法在5.5 L发酵罐中对pPIC9-pEGF/GS115重组毕赤酵母Pichia pastoris菌株进行发酵,在培养至酵母菌体密度(D600nm)约150时,以甲醇诱导目的蛋白表达,48 h后菌体密度达315,目的蛋白表达产量约300 mg/L.发酵上清液经0.45μm和截留相对分子质量30 000的超滤膜、亲和层析、透析后目的产物的纯度达90%以上.鉴定结果表明:纯化的表达产物pEGF对BALB/c 3T3细胞具有显著的增殖作用.
採用高密度髮酵法在5.5 L髮酵罐中對pPIC9-pEGF/GS115重組畢赤酵母Pichia pastoris菌株進行髮酵,在培養至酵母菌體密度(D600nm)約150時,以甲醇誘導目的蛋白錶達,48 h後菌體密度達315,目的蛋白錶達產量約300 mg/L.髮酵上清液經0.45μm和截留相對分子質量30 000的超濾膜、親和層析、透析後目的產物的純度達90%以上.鑒定結果錶明:純化的錶達產物pEGF對BALB/c 3T3細胞具有顯著的增殖作用.
채용고밀도발효법재5.5 L발효관중대pPIC9-pEGF/GS115중조필적효모Pichia pastoris균주진행발효,재배양지효모균체밀도(D600nm)약150시,이갑순유도목적단백표체,48 h후균체밀도체315,목적단백표체산량약300 mg/L.발효상청액경0.45μm화절류상대분자질량30 000적초려막、친화층석、투석후목적산물적순도체90%이상.감정결과표명:순화적표체산물pEGF대BALB/c 3T3세포구유현저적증식작용.
