CAJ | 학술논문

目的研究巨噬细胞吞噬骨髓间充质干细胞(MSCs)后对梗死心肌的修复作用以及可能的机制.方法体外分离培养MSCs,经流式细胞仪分离纯化及进一步缺氧诱导凋亡后与脂多糖激活的巨噬细胞共培养48 h,随后获得吞噬了MSCs的巨噬细胞(pMΦ).将磷酸盐缓冲液(阴性对照组)、MSCs(阳性对照组)、pMΦ(实验1组)、巨噬细胞炎性蛋白( MIP)-lα+ pMΦ(实验2组)经尾静脉注射入急性心肌梗死(AMI)后BALB/C小鼠体内.应用磁共振及多光谱分析仪分析移植后细胞在梗死区的定植及强度,小鼠心脏超声分析移植细胞对小鼠梗死心肌的修复作用,流式细胞技术及弹力纤维染色分析移植细胞修复小鼠梗死心肌的可能机制.结果多光谱分析显示,与阴性对照组相比,阳性对照组、实验1组和实验2组的细胞均可定植于梗死心肌局部,实验1组的相对荧光强度显著高于阳性对照组(P＜0.001),但显著低于实验2组(P＜0.001).AMI后两周小鼠超声心动图显示,阳性对照组、实验1组和实验2组治疗后的射血分数均较阴性对照组有显著改善,其中实验2组的改善最为明显,其次为实验1组,两两比较差异均有统计学意义(P值均＜0.001).弹力纤维染色显示,与阴性对照组比较,阳性对照组、实验1组和实验2组细胞移植治疗后小鼠的心肌梗死面积均显著缩小(P＜0.001),实验1组的心肌梗死面积占左心室面积比例显著低于阳性对照组(P＜0.001),但仍显著高于实验2组(P＜0.001);实验1组的梗死区弹性纤维占梗死区瘢痕的比例显著高于阳性对照组(P＜0.001),但与实验2组的差异无统计学意义(P=0.32).经胰酶消化及流式细胞仪检测结果显示,与阴性对照组比较,阳性对照组、实验1组和实验2组梗死区附近及外周血中修复性的巨噬细胞显著增多(P值均＜0.001),阳性对照组、实验1组、实验2组的CD86阳性巨噬细胞比例依次增多,组间差异均有统计学意义(P值均＜0.001).结论 AMI后移植的pMΦ可有效定植于梗死心肌并显著改善梗死后的心脏功能,其机制与促进弹力纤维增生及促使更多修复性巨噬细胞的动员与募集有关,MIP-1α可增强这种作用. 目的研究巨噬細胞吞噬骨髓間充質榦細胞(MSCs)後對梗死心肌的脩複作用以及可能的機製.方法體外分離培養MSCs,經流式細胞儀分離純化及進一步缺氧誘導凋亡後與脂多糖激活的巨噬細胞共培養48 h,隨後穫得吞噬瞭MSCs的巨噬細胞(pMΦ).將燐痠鹽緩遲液(陰性對照組)、MSCs(暘性對照組)、pMΦ(實驗1組)、巨噬細胞炎性蛋白( MIP)-lα+ pMΦ(實驗2組)經尾靜脈註射入急性心肌梗死(AMI)後BALB/C小鼠體內.應用磁共振及多光譜分析儀分析移植後細胞在梗死區的定植及彊度,小鼠心髒超聲分析移植細胞對小鼠梗死心肌的脩複作用,流式細胞技術及彈力纖維染色分析移植細胞脩複小鼠梗死心肌的可能機製.結果多光譜分析顯示,與陰性對照組相比,暘性對照組、實驗1組和實驗2組的細胞均可定植于梗死心肌跼部,實驗1組的相對熒光彊度顯著高于暘性對照組(P＜0.001),但顯著低于實驗2組(P＜0.001).AMI後兩週小鼠超聲心動圖顯示,暘性對照組、實驗1組和實驗2組治療後的射血分數均較陰性對照組有顯著改善,其中實驗2組的改善最為明顯,其次為實驗1組,兩兩比較差異均有統計學意義(P值均＜0.001).彈力纖維染色顯示,與陰性對照組比較,暘性對照組、實驗1組和實驗2組細胞移植治療後小鼠的心肌梗死麵積均顯著縮小(P＜0.001),實驗1組的心肌梗死麵積佔左心室麵積比例顯著低于暘性對照組(P＜0.001),但仍顯著高于實驗2組(P＜0.001);實驗1組的梗死區彈性纖維佔梗死區瘢痕的比例顯著高于暘性對照組(P＜0.001),但與實驗2組的差異無統計學意義(P=0.32).經胰酶消化及流式細胞儀檢測結果顯示,與陰性對照組比較,暘性對照組、實驗1組和實驗2組梗死區附近及外週血中脩複性的巨噬細胞顯著增多(P值均＜0.001),暘性對照組、實驗1組、實驗2組的CD86暘性巨噬細胞比例依次增多,組間差異均有統計學意義(P值均＜0.001).結論 AMI後移植的pMΦ可有效定植于梗死心肌併顯著改善梗死後的心髒功能,其機製與促進彈力纖維增生及促使更多脩複性巨噬細胞的動員與募集有關,MIP-1α可增彊這種作用.
목적 연구거서세포탄서골수간충질간세포(MSCs)후대경사심기적수복작용이급가능적궤제.방법 체외분리배양MSCs,경류식세포의분리순화급진일보결양유도조망후여지다당격활적거서세포공배양48 h,수후획득탄서료MSCs적거서세포(pMΦ).장린산염완충액(음성대조조)、MSCs(양성대조조)、pMΦ(실험1조)、거서세포염성단백( MIP)-lα+ pMΦ(실험2조)경미정맥주사입급성심기경사(AMI)후BALB/C소서체내.응용자공진급다광보분석의분석이식후세포재경사구적정식급강도,소서심장초성분석이식세포대소서경사심기적수복작용,류식세포기술급탄력섬유염색분석이식세포수복소서경사심기적가능궤제.결과 다광보분석현시,여음성대조조상비,양성대조조、실험1조화실험2조적세포균가정식우경사심기국부,실험1조적상대형광강도현저고우양성대조조(P＜0.001),단현저저우실험2조(P＜0.001).AMI후량주소서초성심동도현시,양성대조조、실험1조화실험2조치료후적사혈분수균교음성대조조유현저개선,기중실험2조적개선최위명현,기차위실험1조,량량비교차이균유통계학의의(P치균＜0.001).탄력섬유염색현시,여음성대조조비교,양성대조조、실험1조화실험2조세포이식치료후소서적심기경사면적균현저축소(P＜0.001),실험1조적심기경사면적점좌심실면적비례현저저우양성대조조(P＜0.001),단잉현저고우실험2조(P＜0.001);실험1조적경사구탄성섬유점경사구반흔적비례현저고우양성대조조(P＜0.001),단여실험2조적차이무통계학의의(P=0.32).경이매소화급류식세포의검측결과현시,여음성대조조비교,양성대조조、실험1조화실험2조경사구부근급외주혈중수복성적거서세포현저증다(P치균＜0.001),양성대조조、실험1조、실험2조적CD86양성거서세포비례의차증다,조간차이균유통계학의의(P치균＜0.001).결론 AMI후이식적pMΦ가유효정식우경사심기병현저개선경사후적심장공능,기궤제여촉진탄력섬유증생급촉사경다수복성거서세포적동원여모집유관,MIP-1α가증강저충작용.