实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2010年
21期
1619-1621,1624
,共4页
欧维琳%朱春江%蒋林彬%韦欢%张明%宋晓丹%吉艳荣
歐維琳%硃春江%蔣林彬%韋歡%張明%宋曉丹%吉豔榮
구유림%주춘강%장림빈%위환%장명%송효단%길염영
白三烯受体%半胱氨酰白三烯%表达%调节%支气管上皮细胞
白三烯受體%半胱氨酰白三烯%錶達%調節%支氣管上皮細胞
백삼희수체%반광안선백삼희%표체%조절%지기관상피세포
目的 研究白三烯受体半胱氨酰白三烯受体1(CysLT1)在支气管上皮细胞中的表达,探讨炎性因子IFN-γ是否参与调节白三烯受体的表达.方法 反转录-PCR(RT-PCR)法检测支气管上皮细胞(BEAS-2B、16HBE、原代细胞)CysLT1 mRNA.采用IFN-γ刺激细胞48 h,RT-PCR法检测CysLT1 mRNA,Western Not法检测细胞膜CysLT1蛋白表达.结果 采用Taq DNA聚合酶RT-PCR法在支气管上皮细胞上未能扩增到CysLT1 mRNA,改用KODTMDNA聚合酶在经过IFN-γ刺激的支气管上皮细胞(BEAS-2B、16HBE、原代细胞)中扩增到CysLT1 mRNA.当IFN-γ水平分别为0、0.1μg·L-1、1.0μg·L-1、10.0μg·L-1、50.0μg·L-1、100.0μg·L-1时,CysLTq mRNA/β-actin相对密度比为0.420±0.013、0.560±0.008、0.680±0.011、1.230±0.023、1.350±0.016、1.880±0.021.当IFN-γ水平分别为0、1.0μg·L、10.0 μg·L-1、50.0 μg·L-1、100.μg·L-1时,CysLT1蛋白相对密度为3.09±0.17、13.27±0.33、27.44±0.29、29.25±0.24、31.42±0.49(P<0.01).提示IFN-γ能上调CysLT1在mRNA水平和蛋白水平的表达,这种上调作用呈浓度依赖性.结论 支气管上皮细胞不仅是一种屏障细胞,也是一种效应细胞,能表达炎性介质白三烯受体CysLT1.上呼吸道感染时局部产生的大量炎性介质IFN-γ,使上皮细胞CysLT1表达上调,增强了白三烯对呼吸道的炎症效应,这可能是病毒性呼吸道感染诱发喘息的机制之一.
目的 研究白三烯受體半胱氨酰白三烯受體1(CysLT1)在支氣管上皮細胞中的錶達,探討炎性因子IFN-γ是否參與調節白三烯受體的錶達.方法 反轉錄-PCR(RT-PCR)法檢測支氣管上皮細胞(BEAS-2B、16HBE、原代細胞)CysLT1 mRNA.採用IFN-γ刺激細胞48 h,RT-PCR法檢測CysLT1 mRNA,Western Not法檢測細胞膜CysLT1蛋白錶達.結果 採用Taq DNA聚閤酶RT-PCR法在支氣管上皮細胞上未能擴增到CysLT1 mRNA,改用KODTMDNA聚閤酶在經過IFN-γ刺激的支氣管上皮細胞(BEAS-2B、16HBE、原代細胞)中擴增到CysLT1 mRNA.噹IFN-γ水平分彆為0、0.1μg·L-1、1.0μg·L-1、10.0μg·L-1、50.0μg·L-1、100.0μg·L-1時,CysLTq mRNA/β-actin相對密度比為0.420±0.013、0.560±0.008、0.680±0.011、1.230±0.023、1.350±0.016、1.880±0.021.噹IFN-γ水平分彆為0、1.0μg·L、10.0 μg·L-1、50.0 μg·L-1、100.μg·L-1時,CysLT1蛋白相對密度為3.09±0.17、13.27±0.33、27.44±0.29、29.25±0.24、31.42±0.49(P<0.01).提示IFN-γ能上調CysLT1在mRNA水平和蛋白水平的錶達,這種上調作用呈濃度依賴性.結論 支氣管上皮細胞不僅是一種屏障細胞,也是一種效應細胞,能錶達炎性介質白三烯受體CysLT1.上呼吸道感染時跼部產生的大量炎性介質IFN-γ,使上皮細胞CysLT1錶達上調,增彊瞭白三烯對呼吸道的炎癥效應,這可能是病毒性呼吸道感染誘髮喘息的機製之一.
목적 연구백삼희수체반광안선백삼희수체1(CysLT1)재지기관상피세포중적표체,탐토염성인자IFN-γ시부삼여조절백삼희수체적표체.방법 반전록-PCR(RT-PCR)법검측지기관상피세포(BEAS-2B、16HBE、원대세포)CysLT1 mRNA.채용IFN-γ자격세포48 h,RT-PCR법검측CysLT1 mRNA,Western Not법검측세포막CysLT1단백표체.결과 채용Taq DNA취합매RT-PCR법재지기관상피세포상미능확증도CysLT1 mRNA,개용KODTMDNA취합매재경과IFN-γ자격적지기관상피세포(BEAS-2B、16HBE、원대세포)중확증도CysLT1 mRNA.당IFN-γ수평분별위0、0.1μg·L-1、1.0μg·L-1、10.0μg·L-1、50.0μg·L-1、100.0μg·L-1시,CysLTq mRNA/β-actin상대밀도비위0.420±0.013、0.560±0.008、0.680±0.011、1.230±0.023、1.350±0.016、1.880±0.021.당IFN-γ수평분별위0、1.0μg·L、10.0 μg·L-1、50.0 μg·L-1、100.μg·L-1시,CysLT1단백상대밀도위3.09±0.17、13.27±0.33、27.44±0.29、29.25±0.24、31.42±0.49(P<0.01).제시IFN-γ능상조CysLT1재mRNA수평화단백수평적표체,저충상조작용정농도의뢰성.결론 지기관상피세포불부시일충병장세포,야시일충효응세포,능표체염성개질백삼희수체CysLT1.상호흡도감염시국부산생적대량염성개질IFN-γ,사상피세포CysLT1표체상조,증강료백삼희대호흡도적염증효응,저가능시병독성호흡도감염유발천식적궤제지일.
