山东大学学报(理学版)
山東大學學報(理學版)
산동대학학보(이학판)
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY
2004年
2期
106-111,115
,共7页
田克立%林建群%刘相梅%刘缨%张长铠%颜望明
田剋立%林建群%劉相梅%劉纓%張長鎧%顏望明
전극립%림건군%류상매%류영%장장개%안망명
氧化硫硫杆菌%磷酸果糖激酶%接合转移
氧化硫硫桿菌%燐痠果糖激酶%接閤轉移
양화류류간균%린산과당격매%접합전이
利用PCR技术扩增E.coli K-12 磷酸果糖激酶-1基因(pfkA),将该基因与广泛寄主的IncQ质粒pJRD215连接构建重组质粒pSDK-1,该质粒可与pfk基因缺陷株E.coli DF1010互补.通过接合转移的方式将其导入专性自养极端嗜酸性氧化硫硫杆菌Tt-Z2中并得到表达.pSDK-1在宿主Tt-Z2中有较好的稳定性,在无选择压力条件下连续传50代仍可保留68%.酶活性测定表明,pSDK-1的pfkA基因在缺陷株E.coli DF1010中表达水平略高于出发菌株E.coli K-12;而在氧化硫硫杆菌中则以较低水平进行表达.葡萄糖可促进含pSDK-1的氧化硫硫杆菌Tt-Z2的生长,而对照菌株的生长则未受明显影响.说明重组菌可部分利用葡萄糖作为碳源而生长.
利用PCR技術擴增E.coli K-12 燐痠果糖激酶-1基因(pfkA),將該基因與廣汎寄主的IncQ質粒pJRD215連接構建重組質粒pSDK-1,該質粒可與pfk基因缺陷株E.coli DF1010互補.通過接閤轉移的方式將其導入專性自養極耑嗜痠性氧化硫硫桿菌Tt-Z2中併得到錶達.pSDK-1在宿主Tt-Z2中有較好的穩定性,在無選擇壓力條件下連續傳50代仍可保留68%.酶活性測定錶明,pSDK-1的pfkA基因在缺陷株E.coli DF1010中錶達水平略高于齣髮菌株E.coli K-12;而在氧化硫硫桿菌中則以較低水平進行錶達.葡萄糖可促進含pSDK-1的氧化硫硫桿菌Tt-Z2的生長,而對照菌株的生長則未受明顯影響.說明重組菌可部分利用葡萄糖作為碳源而生長.
이용PCR기술확증E.coli K-12 린산과당격매-1기인(pfkA),장해기인여엄범기주적IncQ질립pJRD215련접구건중조질립pSDK-1,해질립가여pfk기인결함주E.coli DF1010호보.통과접합전이적방식장기도입전성자양겁단기산성양화류류간균Tt-Z2중병득도표체.pSDK-1재숙주Tt-Z2중유교호적은정성,재무선택압력조건하련속전50대잉가보류68%.매활성측정표명,pSDK-1적pfkA기인재결함주E.coli DF1010중표체수평략고우출발균주E.coli K-12;이재양화류류간균중칙이교저수평진행표체.포도당가촉진함pSDK-1적양화류류간균Tt-Z2적생장,이대조균주적생장칙미수명현영향.설명중조균가부분이용포도당작위탄원이생장.
