汕头大学医学院学报
汕頭大學醫學院學報
산두대학의학원학보
JOURNAL OF SHANTOU UNIVERSITY MEDICAL COLLEGE
2005年
2期
65-67,70
,共4页
禽流感病毒%ns 1基因%修饰%克隆
禽流感病毒%ns 1基因%脩飾%剋隆
금류감병독%ns 1기인%수식%극륭
目的:对H5N1亚型禽流感病毒株(A/Qa/ST/852/01)的ns 1基因进行修饰并构建ns 1基因的真核表达载体.方法:用RT-PCR方法扩增A/Qa/ST/852/01的ns 1基因,之后以扩增产物为模板,采用多重PCR技术对ns 1基因进行修饰,将缺失的15个核苷酸片段插入ns 1基因中,并将其克隆到真核表达载体,构建pcDNA 3.1/ns 1重组质粒.结果:RT-PCR产物测序显示,A/Qa/ST/852/01 ns 1基因开放阅读框全长678 bp,编码225个氨基酸.构建的重组质粒经酶切鉴定和序列测定与预期相一致.结论:成功将缺失的15个核苷酸片段引入A/Qa/ST/852/01的ns 1基因中,重组质粒的构建为NS1蛋白功能研究奠定了基础.
目的:對H5N1亞型禽流感病毒株(A/Qa/ST/852/01)的ns 1基因進行脩飾併構建ns 1基因的真覈錶達載體.方法:用RT-PCR方法擴增A/Qa/ST/852/01的ns 1基因,之後以擴增產物為模闆,採用多重PCR技術對ns 1基因進行脩飾,將缺失的15箇覈苷痠片段插入ns 1基因中,併將其剋隆到真覈錶達載體,構建pcDNA 3.1/ns 1重組質粒.結果:RT-PCR產物測序顯示,A/Qa/ST/852/01 ns 1基因開放閱讀框全長678 bp,編碼225箇氨基痠.構建的重組質粒經酶切鑒定和序列測定與預期相一緻.結論:成功將缺失的15箇覈苷痠片段引入A/Qa/ST/852/01的ns 1基因中,重組質粒的構建為NS1蛋白功能研究奠定瞭基礎.
목적:대H5N1아형금류감병독주(A/Qa/ST/852/01)적ns 1기인진행수식병구건ns 1기인적진핵표체재체.방법:용RT-PCR방법확증A/Qa/ST/852/01적ns 1기인,지후이확증산물위모판,채용다중PCR기술대ns 1기인진행수식,장결실적15개핵감산편단삽입ns 1기인중,병장기극륭도진핵표체재체,구건pcDNA 3.1/ns 1중조질립.결과:RT-PCR산물측서현시,A/Qa/ST/852/01 ns 1기인개방열독광전장678 bp,편마225개안기산.구건적중조질립경매절감정화서렬측정여예기상일치.결론:성공장결실적15개핵감산편단인입A/Qa/ST/852/01적ns 1기인중,중조질립적구건위NS1단백공능연구전정료기출.
