泸州医学院学报
瀘州醫學院學報
로주의학원학보
JOURNAL OF LUZHOU MEDICAL COLLEGE
2005年
5期
397-401
,共5页
杨文理%陈守春%陈毅荣%覃扬
楊文理%陳守春%陳毅榮%覃颺
양문리%진수춘%진의영%담양
肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体%基因合成%聚合酶链式反应
腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體%基因閤成%聚閤酶鏈式反應
종류배사인자상관적조망유도배체%기인합성%취합매련식반응
目的:合成可溶性的肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)的cDNA,并构建其原核表达载体.方法:根据大肠杆菌密码子偏好性和表达载体多克隆位点限制性内切酶要求,设计基因拼接引物,合成TRAIL基因胞膜外段双链cDNA序列,将其连接于克隆载体pMD18-T中;将酶切、纯化的TRAIL基因与经相同处理的载体PSC相连接,转化感受态大肠杆菌JM109,筛选阳性重组子.结果:成功获得了包含TRAIL基因胞膜外段的双链cDNA序列,并成功构建了TRAIL胞膜外段原核表达载体PSC/TRAIL 111-281.结论:采用PCR的方法,实现合成寡核苷酸片段的一次性组装,方便了进一步的克隆.
目的:閤成可溶性的腫瘤壞死因子相關的凋亡誘導配體(TRAIL)的cDNA,併構建其原覈錶達載體.方法:根據大腸桿菌密碼子偏好性和錶達載體多剋隆位點限製性內切酶要求,設計基因拼接引物,閤成TRAIL基因胞膜外段雙鏈cDNA序列,將其連接于剋隆載體pMD18-T中;將酶切、純化的TRAIL基因與經相同處理的載體PSC相連接,轉化感受態大腸桿菌JM109,篩選暘性重組子.結果:成功穫得瞭包含TRAIL基因胞膜外段的雙鏈cDNA序列,併成功構建瞭TRAIL胞膜外段原覈錶達載體PSC/TRAIL 111-281.結論:採用PCR的方法,實現閤成寡覈苷痠片段的一次性組裝,方便瞭進一步的剋隆.
목적:합성가용성적종류배사인자상관적조망유도배체(TRAIL)적cDNA,병구건기원핵표체재체.방법:근거대장간균밀마자편호성화표체재체다극륭위점한제성내절매요구,설계기인병접인물,합성TRAIL기인포막외단쌍련cDNA서렬,장기련접우극륭재체pMD18-T중;장매절、순화적TRAIL기인여경상동처리적재체PSC상련접,전화감수태대장간균JM109,사선양성중조자.결과:성공획득료포함TRAIL기인포막외단적쌍련cDNA서렬,병성공구건료TRAIL포막외단원핵표체재체PSC/TRAIL 111-281.결론:채용PCR적방법,실현합성과핵감산편단적일차성조장,방편료진일보적극륭.
