CAJ | 학술논문

为了探索抗HER2/neu单链抗体与TNF-α联合应用对表面过度表达HER2/neu卵巢癌细胞的生物效应,同时构建了抗HER2/neu单链抗体scFvC6.5的原核表达载体和人TNF-α的原核表达载体,将上述两种重组子分别转化入感受态宿主菌BL21 (DE3),得到稳定表达.表达产物主要以包含体形式存在;包含体经过溶解、变性、复性和纯化,得到了分纯的产物. SDS-PAGE和Western-blot检测结果证实,蛋白表达正确. ELISA法验证了scFvC6.5和人TNF-α具有与卵巢癌细胞SKOV-3的结合活性. MTT细胞毒活性试验进一步表明,相对于单独使用TNF-α,联合应用上述两个重组蛋白细胞毒效应明显提高, SKOV-3细胞对TNF-α的敏感性增强.这将为抗HER2/neu抗体的联合抗肿瘤疗法提供一种新的途径,具有潜在的临床应用价值. 图5 参23
위료탐색항HER2/neu단련항체여TNF-α연합응용대표면과도표체HER2/neu란소암세포적생물효응,동시구건료항HER2/neu단련항체scFvC6.5적원핵표체재체화인TNF-α적원핵표체재체,장상술량충중조자분별전화입감수태숙주균BL21 (DE3),득도은정표체.표체산물주요이포함체형식존재;포함체경과용해、변성、복성화순화,득도료분순적산물. SDS-PAGE화Western-blot검측결과증실,단백표체정학. ELISA법험증료scFvC6.5화인TNF-α구유여란소암세포SKOV-3적결합활성. MTT세포독활성시험진일보표명,상대우단독사용TNF-α,연합응용상술량개중조단백세포독효응명현제고, SKOV-3세포대TNF-α적민감성증강.저장위항HER2/neu항체적연합항종류요법제공일충신적도경,구유잠재적림상응용개치. 도5 삼23