中国实用神经疾病杂志
中國實用神經疾病雜誌
중국실용신경질병잡지
CHINESE JOURNAL OF PRACTICAL NERVOUS DISEASES
2006年
6期
11-14
,共4页
高峰%程豪为%崔新征%郭亮%杜英%张清勇
高峰%程豪為%崔新徵%郭亮%杜英%張清勇
고봉%정호위%최신정%곽량%두영%장청용
重症肌无力%胸腺组织%双向电泳%基质辅助激光解析电离飞行时间质谱%蛋白质组
重癥肌無力%胸腺組織%雙嚮電泳%基質輔助激光解析電離飛行時間質譜%蛋白質組
중증기무력%흉선조직%쌍향전영%기질보조격광해석전리비행시간질보%단백질조
目的 筛选出增生型胸腺组织重症肌无力(myasthenia gravis,MG)相关蛋白,并对其作出鉴定.方法 分别利用异体MG患者血清、正常人血清和自身免疫病患者血清为第一抗体,与电泳转移到硝酸纤维素膜上的蛋白点孵育,做Western Blotting试验;然后在利用双向电泳技术获得的参考凝胶上挖取MG组特异显色点所对应的蛋白质点,经胰蛋白酶胶内酶切,对所得多肽混合物进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorptionionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,得到肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprinting,PMF)数据,登陆http://prospector.ucsf.edu/ucs fhtml4.0/msfit.htm网站,用MS Fit程序在NCBInr.10.13.2004数据库检索,鉴定蛋白质.结果 Western Blotting试验共获得5个MG特异显色点,编号为2、4、6、7、9;经质谱分析得到5个蛋白质PMF图谱,数据库检索这些蛋白分别为:2号蛋白点isopeptidaseT、4号蛋白点importin beta subunit和6号蛋白点SOUL protein.7号和9号蛋白点未能得到确认,需要更换检索条件或进行蛋白质测序才能进一步认定.结论 运用蛋白质组学和Western Blotting研究方法,共获得5个MG相关蛋白,得到鉴定的三个蛋白分别为2号蛋白点isopeptidaseT、4号蛋白点importin beta subunit和6号蛋白点SOUL protein.
目的 篩選齣增生型胸腺組織重癥肌無力(myasthenia gravis,MG)相關蛋白,併對其作齣鑒定.方法 分彆利用異體MG患者血清、正常人血清和自身免疫病患者血清為第一抗體,與電泳轉移到硝痠纖維素膜上的蛋白點孵育,做Western Blotting試驗;然後在利用雙嚮電泳技術穫得的參攷凝膠上挖取MG組特異顯色點所對應的蛋白質點,經胰蛋白酶膠內酶切,對所得多肽混閤物進行基質輔助激光解析電離飛行時間質譜(matrix assisted laser desorptionionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析,得到肽質量指紋圖譜(peptide mass fingerprinting,PMF)數據,登陸http://prospector.ucsf.edu/ucs fhtml4.0/msfit.htm網站,用MS Fit程序在NCBInr.10.13.2004數據庫檢索,鑒定蛋白質.結果 Western Blotting試驗共穫得5箇MG特異顯色點,編號為2、4、6、7、9;經質譜分析得到5箇蛋白質PMF圖譜,數據庫檢索這些蛋白分彆為:2號蛋白點isopeptidaseT、4號蛋白點importin beta subunit和6號蛋白點SOUL protein.7號和9號蛋白點未能得到確認,需要更換檢索條件或進行蛋白質測序纔能進一步認定.結論 運用蛋白質組學和Western Blotting研究方法,共穫得5箇MG相關蛋白,得到鑒定的三箇蛋白分彆為2號蛋白點isopeptidaseT、4號蛋白點importin beta subunit和6號蛋白點SOUL protein.
목적 사선출증생형흉선조직중증기무력(myasthenia gravis,MG)상관단백,병대기작출감정.방법 분별이용이체MG환자혈청、정상인혈청화자신면역병환자혈청위제일항체,여전영전이도초산섬유소막상적단백점부육,주Western Blotting시험;연후재이용쌍향전영기술획득적삼고응효상알취MG조특이현색점소대응적단백질점,경이단백매효내매절,대소득다태혼합물진행기질보조격광해석전리비행시간질보(matrix assisted laser desorptionionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)분석,득도태질량지문도보(peptide mass fingerprinting,PMF)수거,등륙http://prospector.ucsf.edu/ucs fhtml4.0/msfit.htm망참,용MS Fit정서재NCBInr.10.13.2004수거고검색,감정단백질.결과 Western Blotting시험공획득5개MG특이현색점,편호위2、4、6、7、9;경질보분석득도5개단백질PMF도보,수거고검색저사단백분별위:2호단백점isopeptidaseT、4호단백점importin beta subunit화6호단백점SOUL protein.7호화9호단백점미능득도학인,수요경환검색조건혹진행단백질측서재능진일보인정.결론 운용단백질조학화Western Blotting연구방법,공획득5개MG상관단백,득도감정적삼개단백분별위2호단백점isopeptidaseT、4호단백점importin beta subunit화6호단백점SOUL protein.
