癌症
癌癥
암증
CHINESE JOURNAL OF CANCER
2006年
12期
1470-1476
,共7页
ATRA%1,25(OH)2D3%肝肿瘤%HepG2细胞%细胞周期%凋亡%p21WAF1/CIP1%p27KIP1
ATRA%1,25(OH)2D3%肝腫瘤%HepG2細胞%細胞週期%凋亡%p21WAF1/CIP1%p27KIP1
ATRA%1,25(OH)2D3%간종류%HepG2세포%세포주기%조망%p21WAF1/CIP1%p27KIP1
背景与目的:全反式维甲酸(all-trans tinoic acid,ATRA)和1α,25二羟维生素D3[1 alpha,25-dihydroxy vitamin D3,1,25(OH)2D3]已被证实能诱导肿瘤细胞分化,并用于造血系统肿瘤的治疗,但其对实体瘤的影响研究较少.本研究旨在通过单独和联合使用ATRA和1,25(OH)2D3,观察其对肝癌HepG2细胞生长和细胞周期的影响,并探讨其相关机制.方法:HepG2细胞经过不同浓度的ATRA和1,25(OH)2D3单独或联合用药处理后,用MTT法检测细胞抑制率、显微镜观察细胞形态的改变、流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡的变化,同时分别用逆转录多聚酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测细胞周期负调节基因p21WAF1/CIP1和p27KIP1的mRNA及蛋白的表达情况.结果:单独使用ATRA或1,25(OH)2D3和联合用药的HepG2细胞生长均受到抑制,并呈浓度和时间依赖关系,其中联合用药组抑制率明显高于单独用药组(P＜0.05).经10nmol/L 1,25(OH)2D3及联合用药诱导72 h的HepG2细胞G1期细胞占(54.27±3.69)%和(65.64±5.65)%,与对照组[(40.40±1.91)%]相比明显增高(P＜0.05),而1 μmol/LATRA组的细胞周期与对照组相比无明显差异(P＞O.05);同时各实验组均有细胞凋亡产生(P＜0.05),并以联合用药组最为显著.RT-PCR显示10 nmol/L 1,25(OH)2D3和联合用药处理HepG2细胞24 h,p21WAFI/CIP1 mRNA表达与对照组相比分别增高35%和56%;FCM显示两组细胞的P21WAF1/CIP1和P27KIP1的蛋白表达与对照组相比明显增高(P＜0.05),联合用药组更为显著,但经1 μmol/L ATRA诱导的细胞P21WAF1/CIP1和P27KIP1的蛋白表达未见明显改变.结论:ATRA和1,25(OH)2D3均能够抑制HepG2细胞生长,诱导细胞凋亡,1,25(OH)2D3对细胞周期的影响作用是使细胞阻滞在G.期,其作用机制可能与其上调p21WAF1/CIP1和P27KIP1蛋白的表达有关,当与ATRA联合用药时,能够对HepG2细胞生长产生协同抑制作用.
揹景與目的:全反式維甲痠(all-trans tinoic acid,ATRA)和1α,25二羥維生素D3[1 alpha,25-dihydroxy vitamin D3,1,25(OH)2D3]已被證實能誘導腫瘤細胞分化,併用于造血繫統腫瘤的治療,但其對實體瘤的影響研究較少.本研究旨在通過單獨和聯閤使用ATRA和1,25(OH)2D3,觀察其對肝癌HepG2細胞生長和細胞週期的影響,併探討其相關機製.方法:HepG2細胞經過不同濃度的ATRA和1,25(OH)2D3單獨或聯閤用藥處理後,用MTT法檢測細胞抑製率、顯微鏡觀察細胞形態的改變、流式細胞儀檢測細胞週期和細胞凋亡的變化,同時分彆用逆轉錄多聚酶鏈反應(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及流式細胞儀(flow cytometry,FCM)檢測細胞週期負調節基因p21WAF1/CIP1和p27KIP1的mRNA及蛋白的錶達情況.結果:單獨使用ATRA或1,25(OH)2D3和聯閤用藥的HepG2細胞生長均受到抑製,併呈濃度和時間依賴關繫,其中聯閤用藥組抑製率明顯高于單獨用藥組(P＜0.05).經10nmol/L 1,25(OH)2D3及聯閤用藥誘導72 h的HepG2細胞G1期細胞佔(54.27±3.69)%和(65.64±5.65)%,與對照組[(40.40±1.91)%]相比明顯增高(P＜0.05),而1 μmol/LATRA組的細胞週期與對照組相比無明顯差異(P＞O.05);同時各實驗組均有細胞凋亡產生(P＜0.05),併以聯閤用藥組最為顯著.RT-PCR顯示10 nmol/L 1,25(OH)2D3和聯閤用藥處理HepG2細胞24 h,p21WAFI/CIP1 mRNA錶達與對照組相比分彆增高35%和56%;FCM顯示兩組細胞的P21WAF1/CIP1和P27KIP1的蛋白錶達與對照組相比明顯增高(P＜0.05),聯閤用藥組更為顯著,但經1 μmol/L ATRA誘導的細胞P21WAF1/CIP1和P27KIP1的蛋白錶達未見明顯改變.結論:ATRA和1,25(OH)2D3均能夠抑製HepG2細胞生長,誘導細胞凋亡,1,25(OH)2D3對細胞週期的影響作用是使細胞阻滯在G.期,其作用機製可能與其上調p21WAF1/CIP1和P27KIP1蛋白的錶達有關,噹與ATRA聯閤用藥時,能夠對HepG2細胞生長產生協同抑製作用.
배경여목적:전반식유갑산(all-trans tinoic acid,ATRA)화1α,25이간유생소D3[1 alpha,25-dihydroxy vitamin D3,1,25(OH)2D3]이피증실능유도종류세포분화,병용우조혈계통종류적치료,단기대실체류적영향연구교소.본연구지재통과단독화연합사용ATRA화1,25(OH)2D3,관찰기대간암HepG2세포생장화세포주기적영향,병탐토기상관궤제.방법:HepG2세포경과불동농도적ATRA화1,25(OH)2D3단독혹연합용약처리후,용MTT법검측세포억제솔、현미경관찰세포형태적개변、류식세포의검측세포주기화세포조망적변화,동시분별용역전록다취매련반응(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)급류식세포의(flow cytometry,FCM)검측세포주기부조절기인p21WAF1/CIP1화p27KIP1적mRNA급단백적표체정황.결과:단독사용ATRA혹1,25(OH)2D3화연합용약적HepG2세포생장균수도억제,병정농도화시간의뢰관계,기중연합용약조억제솔명현고우단독용약조(P＜0.05).경10nmol/L 1,25(OH)2D3급연합용약유도72 h적HepG2세포G1기세포점(54.27±3.69)%화(65.64±5.65)%,여대조조[(40.40±1.91)%]상비명현증고(P＜0.05),이1 μmol/LATRA조적세포주기여대조조상비무명현차이(P＞O.05);동시각실험조균유세포조망산생(P＜0.05),병이연합용약조최위현저.RT-PCR현시10 nmol/L 1,25(OH)2D3화연합용약처리HepG2세포24 h,p21WAFI/CIP1 mRNA표체여대조조상비분별증고35%화56%;FCM현시량조세포적P21WAF1/CIP1화P27KIP1적단백표체여대조조상비명현증고(P＜0.05),연합용약조경위현저,단경1 μmol/L ATRA유도적세포P21WAF1/CIP1화P27KIP1적단백표체미견명현개변.결론:ATRA화1,25(OH)2D3균능구억제HepG2세포생장,유도세포조망,1,25(OH)2D3대세포주기적영향작용시사세포조체재G.기,기작용궤제가능여기상조p21WAF1/CIP1화P27KIP1단백적표체유관,당여ATRA연합용약시,능구대HepG2세포생장산생협동억제작용.
