中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2006年
z2期
171-173
,共3页
陈嘉昌%张红宇%彭瑾瑜%付艳艳%叶伟超%常弘
陳嘉昌%張紅宇%彭瑾瑜%付豔豔%葉偉超%常弘
진가창%장홍우%팽근유%부염염%협위초%상홍
唾液%基因组DNA%遗传疾病%大面积调查
唾液%基因組DNA%遺傳疾病%大麵積調查
타액%기인조DNA%유전질병%대면적조사
[目的]探索一种对人体无伤害、无痛苦的获取基因组DNA的方法.[方法]比对①获取口腔黏膜细胞的不同途径,②改进的微量血提取试剂盒和常规的碘化钾法提取唾液中的DNA的效果,③经过不同的储存条件、时间梯度所获得的DNA的得率和纯度,④分别以提取的DNA和唾液沉淀作为模板PCR扩增管家基因GAPDH、唾液特异蛋白基因PRB-3、线粒体D-loop区.[结果]从0.1 mL的唾液中即可以提取出约4.5μg的基因组DNA.从新鲜唾液中获得的DNA得率和纯度最高,但即使唾液经过长时间的保存,直接使用唾液的细胞沉淀也同样能够扩增出各种正确大小的基因片段.[结论]唾液作为获取基因组DNA的简易来源,完全可以取代常规的取血采样,也比棉拭子刮取口腔细胞、滤纸唾液斑法、漱口水收集等方法简便、经济、快速.该法不会对被收集者造成任何不适,容易被接收,因而能最大限度的扩大复杂遗传疾病研究的取样范围,特别适合分子流行病学大面积调查.
[目的]探索一種對人體無傷害、無痛苦的穫取基因組DNA的方法.[方法]比對①穫取口腔黏膜細胞的不同途徑,②改進的微量血提取試劑盒和常規的碘化鉀法提取唾液中的DNA的效果,③經過不同的儲存條件、時間梯度所穫得的DNA的得率和純度,④分彆以提取的DNA和唾液沉澱作為模闆PCR擴增管傢基因GAPDH、唾液特異蛋白基因PRB-3、線粒體D-loop區.[結果]從0.1 mL的唾液中即可以提取齣約4.5μg的基因組DNA.從新鮮唾液中穫得的DNA得率和純度最高,但即使唾液經過長時間的保存,直接使用唾液的細胞沉澱也同樣能夠擴增齣各種正確大小的基因片段.[結論]唾液作為穫取基因組DNA的簡易來源,完全可以取代常規的取血採樣,也比棉拭子颳取口腔細胞、濾紙唾液斑法、漱口水收集等方法簡便、經濟、快速.該法不會對被收集者造成任何不適,容易被接收,因而能最大限度的擴大複雜遺傳疾病研究的取樣範圍,特彆適閤分子流行病學大麵積調查.
[목적]탐색일충대인체무상해、무통고적획취기인조DNA적방법.[방법]비대①획취구강점막세포적불동도경,②개진적미량혈제취시제합화상규적전화갑법제취타액중적DNA적효과,③경과불동적저존조건、시간제도소획득적DNA적득솔화순도,④분별이제취적DNA화타액침정작위모판PCR확증관가기인GAPDH、타액특이단백기인PRB-3、선립체D-loop구.[결과]종0.1 mL적타액중즉가이제취출약4.5μg적기인조DNA.종신선타액중획득적DNA득솔화순도최고,단즉사타액경과장시간적보존,직접사용타액적세포침정야동양능구확증출각충정학대소적기인편단.[결론]타액작위획취기인조DNA적간역래원,완전가이취대상규적취혈채양,야비면식자괄취구강세포、려지타액반법、수구수수집등방법간편、경제、쾌속.해법불회대피수집자조성임하불괄,용역피접수,인이능최대한도적확대복잡유전질병연구적취양범위,특별괄합분자류행병학대면적조사.