CAJ | 학술논문

[目的]建立昆明小鼠骨髓问充质干细胞的分离、培养体系,并鉴定其定向诱导分化为神经及脂肪细胞的能力.[方法]采用贴壁培养法分离培养昆明小鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),通过相差倒置显微镜对其进行形态学特征观察;通过碱性磷酸酶(AKP)染色、Hoechst 33258染色,瑞士-姬姆萨复合染色检测MSCs的表型特征;通过β-ME诱导MSCs定向分化为神经样细胞,诱导后的细胞进行H.E染色,观察其形态学特性;通过NF-200,NSE免疫荧光细胞化学方法对已分化的神经样细胞进行鉴定和分化率分析;通过马血清诱导MSCs定向分化为脂肪细胞,观察其体外生长过程,并对诱导后的脂肪细胞进行油红0染色鉴定和分化率分析.[结果]分离得到的MSCs为成纤维样细胞,可见多个核仁,AKP染色阳性率为93.2%±1.5%;β-MB诱导后,MSCs分化为多种表型的神经细胞与原代培养的小鼠全脑细胞的外形相似,诱导后的神经细胞NF-200、NSE免疫荧光细胞化学染色均呈阳性,NF-200阳性率为85.4%±1.8%,NSE阳性率为82.7%±2.1%;马血清诱导后,MSCs可100%分化为脂肪细胞,油红0染色为阳性.[结论]采用贴壁培养法能够成功分离和培养昆明小鼠的MSCs,分离得到的MSCs具有定向分化成多种神经细胞和脂肪细胞的能力.
[목적]건립곤명소서골수문충질간세포적분리、배양체계,병감정기정향유도분화위신경급지방세포적능력.[방법]채용첩벽배양법분리배양곤명소서골수간충질간세포(MSCs),통과상차도치현미경대기진행형태학특정관찰;통과감성린산매(AKP)염색、Hoechst 33258염색,서사-희모살복합염색검측MSCs적표형특정;통과β-ME유도MSCs정향분화위신경양세포,유도후적세포진행H.E염색,관찰기형태학특성;통과NF-200,NSE면역형광세포화학방법대이분화적신경양세포진행감정화분화솔분석;통과마혈청유도MSCs정향분화위지방세포,관찰기체외생장과정,병대유도후적지방세포진행유홍0염색감정화분화솔분석.[결과]분리득도적MSCs위성섬유양세포,가견다개핵인,AKP염색양성솔위93.2%±1.5%;β-MB유도후,MSCs분화위다충표형적신경세포여원대배양적소서전뇌세포적외형상사,유도후적신경세포NF-200、NSE면역형광세포화학염색균정양성,NF-200양성솔위85.4%±1.8%,NSE양성솔위82.7%±2.1%;마혈청유도후,MSCs가100%분화위지방세포,유홍0염색위양성.[결론]채용첩벽배양법능구성공분리화배양곤명소서적MSCs,분리득도적MSCs구유정향분화성다충신경세포화지방세포적능력.