生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2010年
6期
52-54
,共3页
齐向辉%孙储鹏%何晨曦%沈琦%刘学%郭齐%陈华友%徐虹
齊嚮輝%孫儲鵬%何晨晞%瀋琦%劉學%郭齊%陳華友%徐虹
제향휘%손저붕%하신희%침기%류학%곽제%진화우%서홍
pSE380%表达载体%His标签%一步反向PCR
pSE380%錶達載體%His標籤%一步反嚮PCR
pSE380%표체재체%His표첨%일보반향PCR
目的:利用基因重组技术,对已有载体pSE380进行改造,获得具有组氨酸标签的新型表达载体.方法:以pSE380载体为出发材料,通过一步反向PCR技术在多克隆位点处添加一个六聚组氨酸纯化标签,并用该载体对xdh外源基因进行克隆表达及纯化验证.结果:测序结果显示该标签已成功插入,xdh基因克隆表达及纯化表明,镍柱亲和层析完全可以将重组的表达蛋白纯化,并达到电泳纯级别.融合标签并没有影响的该重组酶的功能.结论:通过一步反向PCR技术成功地获得了改造psE380载体,该技术为载体的相关改造提供了一种方便可行的方法.
目的:利用基因重組技術,對已有載體pSE380進行改造,穫得具有組氨痠標籤的新型錶達載體.方法:以pSE380載體為齣髮材料,通過一步反嚮PCR技術在多剋隆位點處添加一箇六聚組氨痠純化標籤,併用該載體對xdh外源基因進行剋隆錶達及純化驗證.結果:測序結果顯示該標籤已成功插入,xdh基因剋隆錶達及純化錶明,鎳柱親和層析完全可以將重組的錶達蛋白純化,併達到電泳純級彆.融閤標籤併沒有影響的該重組酶的功能.結論:通過一步反嚮PCR技術成功地穫得瞭改造psE380載體,該技術為載體的相關改造提供瞭一種方便可行的方法.
목적:이용기인중조기술,대이유재체pSE380진행개조,획득구유조안산표첨적신형표체재체.방법:이pSE380재체위출발재료,통과일보반향PCR기술재다극륭위점처첨가일개륙취조안산순화표첨,병용해재체대xdh외원기인진행극륭표체급순화험증.결과:측서결과현시해표첨이성공삽입,xdh기인극륭표체급순화표명,얼주친화층석완전가이장중조적표체단백순화,병체도전영순급별.융합표첨병몰유영향적해중조매적공능.결론:통과일보반향PCR기술성공지획득료개조psE380재체,해기술위재체적상관개조제공료일충방편가행적방법.
