西安交通大学学报（医学版）
西安交通大學學報（醫學版）
서안교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF XI'AN JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2011年
2期
215-219
,共5页
邓毅恒%窦科峰%张色华%张福琴%李俊杰
鄧毅恆%竇科峰%張色華%張福琴%李俊傑
산의항%두과봉%장색화%장복금%리준걸
肝纤维化%缺氧%缺氧诱导因子-1α%转化生长因子-β1%肝星状细胞
肝纖維化%缺氧%缺氧誘導因子-1α%轉化生長因子-β1%肝星狀細胞
간섬유화%결양%결양유도인자-1α%전화생장인자-β1%간성상세포
目的 探讨缺氧在大鼠肝纤维化形成中的作用机制.方法 建立胆管结扎(bile duct ligation, BDL)大鼠肝纤维化模型,术后1、3、7、14、21、28d取材,观察肝脏组织学及超微结构的改变;逆转录PCR检测转化生长因子-β1(transforming growth factor- β1, TGF-β1)、Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ,Coll-Ⅰ)mRNA的表达;蛋白免疫印迹检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha, HIF-1α)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的表达;缺氧培养原代肝星状细胞(hepatic stellate cell, HSC),逆转录PCR检测HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA的表达,蛋白免疫印迹检测α-SMA的表达.缺氧/常氧下,加TGF-β1中和抗体、HIF-1α诱导剂氯化钴(cobalt chloride, CoCl2)或抑制剂2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol, 2ME2),逆转录PCR检测Coll-I mRNA表达的变化.结果 ①电镜下显示大鼠肝脏术后出现缺氧的表现;②术后3d时,HIF-1α的蛋白表达升高,7d时,TGF-β1、Coll-I mRNA及α-SMA蛋白的表达升高;③缺氧诱导HSC表达HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA及α-SMA蛋白表达的升高;④常氧下CoCl2诱导Coll-I mRNA的表达,中和抗体及2ME2抑制缺氧诱导Coll-I mRNA的表达.结论 缺氧激活HSC,增加细胞外基质的沉积,促进大鼠肝纤维化的形成,其机制与TGF-β1和HIF-α的介导信号通路密切相关.
目的 探討缺氧在大鼠肝纖維化形成中的作用機製.方法 建立膽管結扎(bile duct ligation, BDL)大鼠肝纖維化模型,術後1、3、7、14、21、28d取材,觀察肝髒組織學及超微結構的改變;逆轉錄PCR檢測轉化生長因子-β1(transforming growth factor- β1, TGF-β1)、Ⅰ型膠原(collagen Ⅰ,Coll-Ⅰ)mRNA的錶達;蛋白免疫印跡檢測缺氧誘導因子-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha, HIF-1α)、α-平滑肌肌動蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)的錶達;缺氧培養原代肝星狀細胞(hepatic stellate cell, HSC),逆轉錄PCR檢測HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA的錶達,蛋白免疫印跡檢測α-SMA的錶達.缺氧/常氧下,加TGF-β1中和抗體、HIF-1α誘導劑氯化鈷(cobalt chloride, CoCl2)或抑製劑2-甲氧雌二醇(2-methoxyestradiol, 2ME2),逆轉錄PCR檢測Coll-I mRNA錶達的變化.結果 ①電鏡下顯示大鼠肝髒術後齣現缺氧的錶現;②術後3d時,HIF-1α的蛋白錶達升高,7d時,TGF-β1、Coll-I mRNA及α-SMA蛋白的錶達升高;③缺氧誘導HSC錶達HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA及α-SMA蛋白錶達的升高;④常氧下CoCl2誘導Coll-I mRNA的錶達,中和抗體及2ME2抑製缺氧誘導Coll-I mRNA的錶達.結論 缺氧激活HSC,增加細胞外基質的沉積,促進大鼠肝纖維化的形成,其機製與TGF-β1和HIF-α的介導信號通路密切相關.
목적 탐토결양재대서간섬유화형성중적작용궤제.방법 건립담관결찰(bile duct ligation, BDL)대서간섬유화모형,술후1、3、7、14、21、28d취재,관찰간장조직학급초미결구적개변;역전록PCR검측전화생장인자-β1(transforming growth factor- β1, TGF-β1)、Ⅰ형효원(collagen Ⅰ,Coll-Ⅰ)mRNA적표체;단백면역인적검측결양유도인자-1α(hypoxia-inducible factor-1 alpha, HIF-1α)、α-평활기기동단백(α-smooth muscle actin, α-SMA)적표체;결양배양원대간성상세포(hepatic stellate cell, HSC),역전록PCR검측HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA적표체,단백면역인적검측α-SMA적표체.결양/상양하,가TGF-β1중화항체、HIF-1α유도제록화고(cobalt chloride, CoCl2)혹억제제2-갑양자이순(2-methoxyestradiol, 2ME2),역전록PCR검측Coll-I mRNA표체적변화.결과 ①전경하현시대서간장술후출현결양적표현;②술후3d시,HIF-1α적단백표체승고,7d시,TGF-β1、Coll-I mRNA급α-SMA단백적표체승고;③결양유도HSC표체HIF-1α、TGF-β1、Coll-I mRNA급α-SMA단백표체적승고;④상양하CoCl2유도Coll-I mRNA적표체,중화항체급2ME2억제결양유도Coll-I mRNA적표체.결론 결양격활HSC,증가세포외기질적침적,촉진대서간섬유화적형성,기궤제여TGF-β1화HIF-α적개도신호통로밀절상관.
