广西医科大学学报
廣西醫科大學學報
엄서의과대학학보
JOURNAL OF GUANGXI MEDICAL UNIVERSITY
2011年
1期
31-35
,共5页
杨华%丘映%刘锋%邓志华%邹彦%史秋雯
楊華%丘映%劉鋒%鄧誌華%鄒彥%史鞦雯
양화%구영%류봉%산지화%추언%사추문
胚胎干细胞%囊胚%免疫切割%全囊胚法
胚胎榦細胞%囊胚%免疫切割%全囊胚法
배태간세포%낭배%면역절할%전낭배법
目的:探讨应用卵裂期废弃胚胎,采用两种不同培养法建立人胚胎干细胞(hESC)系的方法.方法:将临床IVF及ICSI周期中剩余废弃的卵裂期胚胎继续培养至扩张囊胚,分别用免疫切割法及全囊胚培养法分离出内细胞团(ICM),接种在用丝裂霉素处理过的小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上,用hESC培养液培养、传代,建立胚胎干细胞系.通过胚胎干细胞生物学特性、特异性表面标志物、核型分析及体内外分化全能性等传统方法进行鉴定.结果:132枚废弃的卵裂期胚胎在体外继续培养后,有28枚发育为囊胚,随机分组14枚囊胚采用免疫切割法分离ICM,未得到干细胞系;另14枚采用全囊胚培养法,最终得到1个干细胞系,经鉴定,这些细胞都具有hESC的生物学特性.结论:①部分废弃卵裂期胚胎能够发育至囊胚期,可作为建立hESC系的材料来源之一;②全囊胚培养法建系成功率高于免疫切割法,尤其适用于评分低的囊胚.
目的:探討應用卵裂期廢棄胚胎,採用兩種不同培養法建立人胚胎榦細胞(hESC)繫的方法.方法:將臨床IVF及ICSI週期中剩餘廢棄的卵裂期胚胎繼續培養至擴張囊胚,分彆用免疫切割法及全囊胚培養法分離齣內細胞糰(ICM),接種在用絲裂黴素處理過的小鼠胚胎成纖維細胞飼養層上,用hESC培養液培養、傳代,建立胚胎榦細胞繫.通過胚胎榦細胞生物學特性、特異性錶麵標誌物、覈型分析及體內外分化全能性等傳統方法進行鑒定.結果:132枚廢棄的卵裂期胚胎在體外繼續培養後,有28枚髮育為囊胚,隨機分組14枚囊胚採用免疫切割法分離ICM,未得到榦細胞繫;另14枚採用全囊胚培養法,最終得到1箇榦細胞繫,經鑒定,這些細胞都具有hESC的生物學特性.結論:①部分廢棄卵裂期胚胎能夠髮育至囊胚期,可作為建立hESC繫的材料來源之一;②全囊胚培養法建繫成功率高于免疫切割法,尤其適用于評分低的囊胚.
목적:탐토응용란렬기폐기배태,채용량충불동배양법건립인배태간세포(hESC)계적방법.방법:장림상IVF급ICSI주기중잉여폐기적란렬기배태계속배양지확장낭배,분별용면역절할법급전낭배배양법분리출내세포단(ICM),접충재용사렬매소처리과적소서배태성섬유세포사양층상,용hESC배양액배양、전대,건립배태간세포계.통과배태간세포생물학특성、특이성표면표지물、핵형분석급체내외분화전능성등전통방법진행감정.결과:132매폐기적란렬기배태재체외계속배양후,유28매발육위낭배,수궤분조14매낭배채용면역절할법분리ICM,미득도간세포계;령14매채용전낭배배양법,최종득도1개간세포계,경감정,저사세포도구유hESC적생물학특성.결론:①부분폐기란렬기배태능구발육지낭배기,가작위건립hESC계적재료래원지일;②전낭배배양법건계성공솔고우면역절할법,우기괄용우평분저적낭배.
