上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2011年
4期
417-420
,共4页
李玉峰%沈加%吴伟岚%陈同辛%陈慧敏%林芊%董瑜%金晶%卫敏江
李玉峰%瀋加%吳偉嵐%陳同辛%陳慧敏%林芊%董瑜%金晶%衛敏江
리옥봉%침가%오위람%진동신%진혜민%림천%동유%금정%위민강
细胞凋亡%Bcl-2%G1期%Fas
細胞凋亡%Bcl-2%G1期%Fas
세포조망%Bcl-2%G1기%Fas
目的 分析Fas诱导的B淋巴瘤细胞株MML-1凋亡过程中,PMA阻断MML-1进入细胞周期后细胞凋亡敏感性降低的原因.方法 采用10 nmol/L PMA预处理MML-1细胞24 h,用流式细胞仪检测PMA阻断细胞周期前后50 ng/mL抗Fas抗体诱导的MML-1细胞凋亡率的变化.采用PI-Triton X和active caspase-3/8双染色、Western blotting技术分析PMA处理前后,经抗Fas抗体诱导的MML-1细胞内活化caspase-3/8的表达.通过Western blotting技术检测G1期细胞的凋亡相关蛋白caspase-3/8、Bcl-2、FLIP和Akt的表达.结果 PMA预处理MML-1细胞24 h后,G1期细胞比例显著升高,达93.77%.PMA预处理前,抗Fas抗体诱导6 h后的MML-1细胞凋亡率为56%;经PMA预处理,抗Fas抗体诱导6 h后的MML-1细胞凋亡率为14%.流式细胞术和Western blotting检测发现经PMA预处理,抗Fas抗体诱导后活化caspase-3和caspase-8蛋白的表达受到显著抑制.Westernblotting检测显示G1期细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达上调.结论 将MML-1细胞阻断在G1期能够抑制Fas诱导的细胞凋亡,可能与凋亡抑制分子Bcl-2在G1期的表达上调有关.
目的 分析Fas誘導的B淋巴瘤細胞株MML-1凋亡過程中,PMA阻斷MML-1進入細胞週期後細胞凋亡敏感性降低的原因.方法 採用10 nmol/L PMA預處理MML-1細胞24 h,用流式細胞儀檢測PMA阻斷細胞週期前後50 ng/mL抗Fas抗體誘導的MML-1細胞凋亡率的變化.採用PI-Triton X和active caspase-3/8雙染色、Western blotting技術分析PMA處理前後,經抗Fas抗體誘導的MML-1細胞內活化caspase-3/8的錶達.通過Western blotting技術檢測G1期細胞的凋亡相關蛋白caspase-3/8、Bcl-2、FLIP和Akt的錶達.結果 PMA預處理MML-1細胞24 h後,G1期細胞比例顯著升高,達93.77%.PMA預處理前,抗Fas抗體誘導6 h後的MML-1細胞凋亡率為56%;經PMA預處理,抗Fas抗體誘導6 h後的MML-1細胞凋亡率為14%.流式細胞術和Western blotting檢測髮現經PMA預處理,抗Fas抗體誘導後活化caspase-3和caspase-8蛋白的錶達受到顯著抑製.Westernblotting檢測顯示G1期細胞中凋亡抑製蛋白Bcl-2的錶達上調.結論 將MML-1細胞阻斷在G1期能夠抑製Fas誘導的細胞凋亡,可能與凋亡抑製分子Bcl-2在G1期的錶達上調有關.
목적 분석Fas유도적B림파류세포주MML-1조망과정중,PMA조단MML-1진입세포주기후세포조망민감성강저적원인.방법 채용10 nmol/L PMA예처리MML-1세포24 h,용류식세포의검측PMA조단세포주기전후50 ng/mL항Fas항체유도적MML-1세포조망솔적변화.채용PI-Triton X화active caspase-3/8쌍염색、Western blotting기술분석PMA처리전후,경항Fas항체유도적MML-1세포내활화caspase-3/8적표체.통과Western blotting기술검측G1기세포적조망상관단백caspase-3/8、Bcl-2、FLIP화Akt적표체.결과 PMA예처리MML-1세포24 h후,G1기세포비례현저승고,체93.77%.PMA예처리전,항Fas항체유도6 h후적MML-1세포조망솔위56%;경PMA예처리,항Fas항체유도6 h후적MML-1세포조망솔위14%.류식세포술화Western blotting검측발현경PMA예처리,항Fas항체유도후활화caspase-3화caspase-8단백적표체수도현저억제.Westernblotting검측현시G1기세포중조망억제단백Bcl-2적표체상조.결론 장MML-1세포조단재G1기능구억제Fas유도적세포조망,가능여조망억제분자Bcl-2재G1기적표체상조유관.
