植物病理学报
植物病理學報
식물병이학보
ACTA PHYTOPATHOLOGICA SINICA
2011年
3期
247-252
,共6页
王君%叶刚%马燕侠%王国平%洪霓
王君%葉剛%馬燕俠%王國平%洪霓
왕군%협강%마연협%왕국평%홍예
抗铜基因%PCR%原核表达%Western blot%柑橘溃疡病菌
抗銅基因%PCR%原覈錶達%Western blot%柑橘潰瘍病菌
항동기인%PCR%원핵표체%Western blot%감귤궤양병균
以柑橘溃疡病菌DNA为模板,对抗铜相关基因copA和copB进行了PCR扩增和克隆,获得了大小分别为1 782 bp 和1 095 bp的目标片段.构建了这2个基因的原核表达载体(pET-copA和pET-copB),并在大肠杆菌[Escherichia coliBL21(DE3)]中成功诱导表达.利用原核表达的融合蛋白免疫大耳白兔,制备了抗copA和copB原核表达蛋白的多克隆抗体.用间接ELISA法测定了所制备的多克隆抗体的效价均为1∶6 400.用所制备的抗体分别对copA和copB的原核表达产物进行Western blot分析的结果显示,在相应位置产生了较强的免疫反应条带,表明所制备抗体能特异性地与相应的抗原发生免疫反应.
以柑橘潰瘍病菌DNA為模闆,對抗銅相關基因copA和copB進行瞭PCR擴增和剋隆,穫得瞭大小分彆為1 782 bp 和1 095 bp的目標片段.構建瞭這2箇基因的原覈錶達載體(pET-copA和pET-copB),併在大腸桿菌[Escherichia coliBL21(DE3)]中成功誘導錶達.利用原覈錶達的融閤蛋白免疫大耳白兔,製備瞭抗copA和copB原覈錶達蛋白的多剋隆抗體.用間接ELISA法測定瞭所製備的多剋隆抗體的效價均為1∶6 400.用所製備的抗體分彆對copA和copB的原覈錶達產物進行Western blot分析的結果顯示,在相應位置產生瞭較彊的免疫反應條帶,錶明所製備抗體能特異性地與相應的抗原髮生免疫反應.
이감귤궤양병균DNA위모판,대항동상관기인copA화copB진행료PCR확증화극륭,획득료대소분별위1 782 bp 화1 095 bp적목표편단.구건료저2개기인적원핵표체재체(pET-copA화pET-copB),병재대장간균[Escherichia coliBL21(DE3)]중성공유도표체.이용원핵표체적융합단백면역대이백토,제비료항copA화copB원핵표체단백적다극륭항체.용간접ELISA법측정료소제비적다극륭항체적효개균위1∶6 400.용소제비적항체분별대copA화copB적원핵표체산물진행Western blot분석적결과현시,재상응위치산생료교강적면역반응조대,표명소제비항체능특이성지여상응적항원발생면역반응.
