中国畜牧兽医
中國畜牧獸醫
중국축목수의
CHINA ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2011年
6期
68-71
,共4页
张冬琳%杜丽%成鹰%刘涛%雷明%满初日嘎%王凤阳
張鼕琳%杜麗%成鷹%劉濤%雷明%滿初日嘎%王鳳暘
장동림%두려%성응%류도%뢰명%만초일알%왕봉양
海南黄牛%Cdc42%原核表达%纯化
海南黃牛%Cdc42%原覈錶達%純化
해남황우%Cdc42%원핵표체%순화
试验以构建的海南黄牛外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR的方法筛选出海南黄牛细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)全长cDNA,构建pET28a-Cdc42重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行可溶性分析和蛋白纯化,并应用Western blotting对其进行鉴定.结果显示,海南黄牛Cdc42 cDNA的编码框由576个碱基组成,编码191个氨基酸,融合蛋白分子质量约为30 ku,该蛋白主要以包涵体形式存在;纯化后的蛋白经Western blotting检测,发现对应大小的特异性条带,表明本试验成功克隆Cdc42并表达.
試驗以構建的海南黃牛外週血白細胞cDNA文庫為材料,採用菌落PCR的方法篩選齣海南黃牛細胞分裂週期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)全長cDNA,構建pET28a-Cdc42重組質粒,經IPTG誘導錶達後,進行可溶性分析和蛋白純化,併應用Western blotting對其進行鑒定.結果顯示,海南黃牛Cdc42 cDNA的編碼框由576箇堿基組成,編碼191箇氨基痠,融閤蛋白分子質量約為30 ku,該蛋白主要以包涵體形式存在;純化後的蛋白經Western blotting檢測,髮現對應大小的特異性條帶,錶明本試驗成功剋隆Cdc42併錶達.
시험이구건적해남황우외주혈백세포cDNA문고위재료,채용균락PCR적방법사선출해남황우세포분렬주기단백42(cell division cycle 42,Cdc42)전장cDNA,구건pET28a-Cdc42중조질립,경IPTG유도표체후,진행가용성분석화단백순화,병응용Western blotting대기진행감정.결과현시,해남황우Cdc42 cDNA적편마광유576개감기조성,편마191개안기산,융합단백분자질량약위30 ku,해단백주요이포함체형식존재;순화후적단백경Western blotting검측,발현대응대소적특이성조대,표명본시험성공극륭Cdc42병표체.
