食品与生物技术学报
食品與生物技術學報
식품여생물기술학보
JOURNAL OF FOOD SCIENCE AND BIOTECHNOLOGY
2011年
6期
940-944
,共5页
王月宏%段作营%邵蔚蓝%李华钟
王月宏%段作營%邵蔚藍%李華鐘
왕월굉%단작영%소위람%리화종
α-葡萄糖苷酶%海栖热袍菌%NAD+%酶学性质
α-葡萄糖苷酶%海棲熱袍菌%NAD+%酶學性質
α-포도당감매%해서열포균%NAD+%매학성질
主要研究了在大肠杆菌中克隆和表达海栖热袍菌(Thermotoga maritima)的一个α-葡萄糖苷酶(TM1834).通过PCR方法克隆编码T.maritima的一个α-葡萄糖苷酶基因aglA,构建重组质粒pHsh-AglA,电击转化Escherichia coli JM109,通过热激诱导高效表达.SDS-PAGE检测出蛋白相对分子质量约55 000,经热处理,阴离子交换层析和疏水层析纯化后的α-葡萄糖苷酶最适反应温度为90℃,最适反应pH为7.5,在pH 6.5～8.5,温度65～100℃之间酶活仍达到50％以上.在辅助因子NAD+,Mn2+和还原剂DTT的存在条件下达到最高酶活.
主要研究瞭在大腸桿菌中剋隆和錶達海棲熱袍菌(Thermotoga maritima)的一箇α-葡萄糖苷酶(TM1834).通過PCR方法剋隆編碼T.maritima的一箇α-葡萄糖苷酶基因aglA,構建重組質粒pHsh-AglA,電擊轉化Escherichia coli JM109,通過熱激誘導高效錶達.SDS-PAGE檢測齣蛋白相對分子質量約55 000,經熱處理,陰離子交換層析和疏水層析純化後的α-葡萄糖苷酶最適反應溫度為90℃,最適反應pH為7.5,在pH 6.5～8.5,溫度65～100℃之間酶活仍達到50％以上.在輔助因子NAD+,Mn2+和還原劑DTT的存在條件下達到最高酶活.
주요연구료재대장간균중극륭화표체해서열포균(Thermotoga maritima)적일개α-포도당감매(TM1834).통과PCR방법극륭편마T.maritima적일개α-포도당감매기인aglA,구건중조질립pHsh-AglA,전격전화Escherichia coli JM109,통과열격유도고효표체.SDS-PAGE검측출단백상대분자질량약55 000,경열처리,음리자교환층석화소수층석순화후적α-포도당감매최괄반응온도위90℃,최괄반응pH위7.5,재pH 6.5～8.5,온도65～100℃지간매활잉체도50％이상.재보조인자NAD+,Mn2+화환원제DTT적존재조건하체도최고매활.
