重庆医科大学学报
重慶醫科大學學報
중경의과대학학보
UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
2012年
4期
302-306
,共5页
潘明%向廷秀%章海林%陈妮%陈飞兰%赖国旗
潘明%嚮廷秀%章海林%陳妮%陳飛蘭%賴國旂
반명%향정수%장해림%진니%진비란%뢰국기
宫颈癌细胞%双表达载体%TRAIL基因%IL-24基因
宮頸癌細胞%雙錶達載體%TRAIL基因%IL-24基因
궁경암세포%쌍표체재체%TRAIL기인%IL-24기인
目的:构建肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因和白细胞介素24( Interleutin-24,IL-24)基因的真核双基因表达载体,并观察其对宫颈癌细胞生长的影响情况.方法:采用分子克隆技术,将IL-24基因插入真核表达载体pBud-TRAIL中,构建双表达质粒pBud-TRAIL-IL-24,经酶切和测序鉴定后,转染宫颈癌HeLa细胞.荧光显微镜和免疫荧光双标技术检测TRAIL和IL-24在HeLa细胞中的表达.MTr法检测重组质粒对HeLa细胞生长状况的影响.结果:成功构建了真核双基因表达载体pBud-TRAIL-IL-24,并在宫颈癌细胞中表达;转染48 h后可见重组质粒对宫颈癌细胞生长有明显抑制作用(P<0.05).结论:构建的双表达载体pBud-TRAIL-IL-24能在宫颈癌细胞中表达,并可有效抑制宫颈癌HeLa细胞增殖,为进一步研究TRAIL和IL-24联合应用于宫颈癌的基因治疗奠定了基础.
目的:構建腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)基因和白細胞介素24( Interleutin-24,IL-24)基因的真覈雙基因錶達載體,併觀察其對宮頸癌細胞生長的影響情況.方法:採用分子剋隆技術,將IL-24基因插入真覈錶達載體pBud-TRAIL中,構建雙錶達質粒pBud-TRAIL-IL-24,經酶切和測序鑒定後,轉染宮頸癌HeLa細胞.熒光顯微鏡和免疫熒光雙標技術檢測TRAIL和IL-24在HeLa細胞中的錶達.MTr法檢測重組質粒對HeLa細胞生長狀況的影響.結果:成功構建瞭真覈雙基因錶達載體pBud-TRAIL-IL-24,併在宮頸癌細胞中錶達;轉染48 h後可見重組質粒對宮頸癌細胞生長有明顯抑製作用(P<0.05).結論:構建的雙錶達載體pBud-TRAIL-IL-24能在宮頸癌細胞中錶達,併可有效抑製宮頸癌HeLa細胞增殖,為進一步研究TRAIL和IL-24聯閤應用于宮頸癌的基因治療奠定瞭基礎.
목적:구건종류배사인자상관조망유도배체(Tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)기인화백세포개소24( Interleutin-24,IL-24)기인적진핵쌍기인표체재체,병관찰기대궁경암세포생장적영향정황.방법:채용분자극륭기술,장IL-24기인삽입진핵표체재체pBud-TRAIL중,구건쌍표체질립pBud-TRAIL-IL-24,경매절화측서감정후,전염궁경암HeLa세포.형광현미경화면역형광쌍표기술검측TRAIL화IL-24재HeLa세포중적표체.MTr법검측중조질립대HeLa세포생장상황적영향.결과:성공구건료진핵쌍기인표체재체pBud-TRAIL-IL-24,병재궁경암세포중표체;전염48 h후가견중조질립대궁경암세포생장유명현억제작용(P<0.05).결론:구건적쌍표체재체pBud-TRAIL-IL-24능재궁경암세포중표체,병가유효억제궁경암HeLa세포증식,위진일보연구TRAIL화IL-24연합응용우궁경암적기인치료전정료기출.