CAJ | 학술논문

目的研究乳糖化多聚赖氨酸(Gal-PLL)导向反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒(HBV)基因表达的特异性抑制作用。方法　根据聚合酶链反应(PCR)产物直接测序结果，在HBV U5样序列区合成了一段16聚硫代磷酸反义寡核苷酸，并将其与肝靶向配体Gal-PLL连接，在2.2.15细胞比较，观察了它们对HBV基因表达的影响。结果　通过测序确定了2.2.15细胞中HBV DNA属于HBV表面抗原ayw1亚型，并将此用于反义寡核苷酸的序列设计；经荧光组化分析表明，Gal-PLL对大鼠肝组织有选择性亲和力；Gal-PLL与DNA形成复合物的最佳摩尔比为2∶1；在相同实验条件下，硫代磷酸反义寡核苷酸对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为70%和58%，而Gal-PLL硫代磷酸反义寡核苷酸对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为96%和82%，同时培养上清液和细胞中HBV DNA的含量明显下降，无关序列寡核酸无明显效果，寡核苷酸对细胞未产生毒性。结论　肝靶向配体和反义寡核酸的复合物可以通过无唾液酸糖蛋白受体靶入2.2.15细胞内，并对HBV基因表达和复制产生特异性抑制作用。
목적연구유당화다취뢰안산(Gal-PLL)도향반의과핵감산대을형간염병독(HBV)기인표체적특이성억제작용。방법　근거취합매련반응(PCR)산물직접측서결과，재HBV U5양서렬구합성료일단16취류대린산반의과핵감산，병장기여간파향배체Gal-PLL련접，재2.2.15세포비교，관찰료타문대HBV기인표체적영향。결과　통과측서학정료2.2.15세포중HBV DNA속우HBV표면항원ayw1아형，병장차용우반의과핵감산적서렬설계；경형광조화분석표명，Gal-PLL대대서간조직유선택성친화력；Gal-PLL여DNA형성복합물적최가마이비위2∶1；재상동실험조건하，류대린산반의과핵감산대HBsAg화HBeAg적억제솔분별위70%화58%，이Gal-PLL류대린산반의과핵감산대HBsAg화HBeAg적억제솔분별위96%화82%，동시배양상청액화세포중HBV DNA적함량명현하강，무관서렬과핵산무명현효과，과핵감산대세포미산생독성。결론　간파향배체화반의과핵산적복합물가이통과무타액산당단백수체파입2.2.15세포내，병대HBV기인표체화복제산생특이성억제작용。