四川大学学报(医学版)
四川大學學報(醫學版)
사천대학학보(의학판)
JOURNAL OF WEST CHINA UNIVERSITY OF MEDICAL SCIENCES
2004年
5期
612-614,633
,共4页
邓小玲%蔡美英%魏大鹏%胡丽娟%毕建虹%袁暾
鄧小玲%蔡美英%魏大鵬%鬍麗娟%畢建虹%袁暾
산소령%채미영%위대붕%호려연%필건홍%원돈
甲胎蛋白%克隆%真核表达
甲胎蛋白%剋隆%真覈錶達
갑태단백%극륭%진핵표체
目的构建人AFP全长基因编码序列的真核表达质粒,并在CHO及小鼠肌肉组织中表达.方法从人胎肝组织中提取AFP基因,以全长基因序列为目的基因片段,真核表达质粒pcDNA3.1(+)为载体,构建AFP重组质粒phAFP,经酶切分析和DNA测序对phAFP进行鉴定.重组质粒phAFP经脂质体转染真核细胞CHO以及直接注射小鼠胫前肌,并采用免疫荧光染色及免疫组化对其表达产物进行检测. 结果获取的AFP基因片段与GenBank报道的序列一致,确认为人AFP基因的全长编码序列, 构建的重组质粒phAFP能在体外真核细胞CHO、体内肌细胞中有效表达.结论成功构建了能在真核细胞中表达的重组质粒phAFP,为AFP DNA疫苗治疗肝癌的研究打下基础.
目的構建人AFP全長基因編碼序列的真覈錶達質粒,併在CHO及小鼠肌肉組織中錶達.方法從人胎肝組織中提取AFP基因,以全長基因序列為目的基因片段,真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)為載體,構建AFP重組質粒phAFP,經酶切分析和DNA測序對phAFP進行鑒定.重組質粒phAFP經脂質體轉染真覈細胞CHO以及直接註射小鼠脛前肌,併採用免疫熒光染色及免疫組化對其錶達產物進行檢測. 結果穫取的AFP基因片段與GenBank報道的序列一緻,確認為人AFP基因的全長編碼序列, 構建的重組質粒phAFP能在體外真覈細胞CHO、體內肌細胞中有效錶達.結論成功構建瞭能在真覈細胞中錶達的重組質粒phAFP,為AFP DNA疫苗治療肝癌的研究打下基礎.
목적구건인AFP전장기인편마서렬적진핵표체질립,병재CHO급소서기육조직중표체.방법종인태간조직중제취AFP기인,이전장기인서렬위목적기인편단,진핵표체질립pcDNA3.1(+)위재체,구건AFP중조질립phAFP,경매절분석화DNA측서대phAFP진행감정.중조질립phAFP경지질체전염진핵세포CHO이급직접주사소서경전기,병채용면역형광염색급면역조화대기표체산물진행검측. 결과획취적AFP기인편단여GenBank보도적서렬일치,학인위인AFP기인적전장편마서렬, 구건적중조질립phAFP능재체외진핵세포CHO、체내기세포중유효표체.결론성공구건료능재진핵세포중표체적중조질립phAFP,위AFP DNA역묘치료간암적연구타하기출.
