脑与神经疾病杂志
腦與神經疾病雜誌
뇌여신경질병잡지
JOURNAL OF BRAIN AND NERVOUS DISEASES
2006年
5期
350-353
,共4页
海马神经元%膜片钳技术%钙激活钾通道%缺氧
海馬神經元%膜片鉗技術%鈣激活鉀通道%缺氧
해마신경원%막편겸기술%개격활갑통도%결양
目的:本实验采用膜片钳单通道技术研究缺氧条件下对培养新生大鼠海马神经元钙激活钾通道的作用;方法:取1～3天的SD大鼠海马神经元组织,制成细胞悬液,加入含80%DMEM(dulbecco's modified eagle's medium)、20%小牛血清培养基进行培养,将培养3～5天的形态典型的神经元置于对称性高钾溶液中,用膜片钳技术记录单通道电流,其通道电流通过膜片钳放大器(CEZ-2200)放大,滤波(3KHz)后,经A/D、D/A转换器输入计算机,采用pClamp6.0.6软件采样分析;结果:在细胞贴附式下,应用氰化钠(20μmol/L)造成细胞急性缺氧,在缺氧早期(5～20min)通道开放概率增加(P＜0.01或P＜0.05,n=5),而缺氧后期(20～30min),通道开放概率明显降低,表明缺氧时间对通道的开放概率有明显影响.结论:缺氧早期神经元钙激活钾通道有自身激活作用,当钙激活钾通道激活时,钾离子外流增加,产生膜的复极化,使去极化不易产生,从而稳定细胞膜及降低细胞的兴奋性,这可能是缺氧早期神经元自身的一种代偿机制.
目的:本實驗採用膜片鉗單通道技術研究缺氧條件下對培養新生大鼠海馬神經元鈣激活鉀通道的作用;方法:取1～3天的SD大鼠海馬神經元組織,製成細胞懸液,加入含80%DMEM(dulbecco's modified eagle's medium)、20%小牛血清培養基進行培養,將培養3～5天的形態典型的神經元置于對稱性高鉀溶液中,用膜片鉗技術記錄單通道電流,其通道電流通過膜片鉗放大器(CEZ-2200)放大,濾波(3KHz)後,經A/D、D/A轉換器輸入計算機,採用pClamp6.0.6軟件採樣分析;結果:在細胞貼附式下,應用氰化鈉(20μmol/L)造成細胞急性缺氧,在缺氧早期(5～20min)通道開放概率增加(P＜0.01或P＜0.05,n=5),而缺氧後期(20～30min),通道開放概率明顯降低,錶明缺氧時間對通道的開放概率有明顯影響.結論:缺氧早期神經元鈣激活鉀通道有自身激活作用,噹鈣激活鉀通道激活時,鉀離子外流增加,產生膜的複極化,使去極化不易產生,從而穩定細胞膜及降低細胞的興奮性,這可能是缺氧早期神經元自身的一種代償機製.
목적:본실험채용막편겸단통도기술연구결양조건하대배양신생대서해마신경원개격활갑통도적작용;방법:취1～3천적SD대서해마신경원조직,제성세포현액,가입함80%DMEM(dulbecco's modified eagle's medium)、20%소우혈청배양기진행배양,장배양3～5천적형태전형적신경원치우대칭성고갑용액중,용막편겸기술기록단통도전류,기통도전류통과막편겸방대기(CEZ-2200)방대,려파(3KHz)후,경A/D、D/A전환기수입계산궤,채용pClamp6.0.6연건채양분석;결과:재세포첩부식하,응용청화납(20μmol/L)조성세포급성결양,재결양조기(5～20min)통도개방개솔증가(P＜0.01혹P＜0.05,n=5),이결양후기(20～30min),통도개방개솔명현강저,표명결양시간대통도적개방개솔유명현영향.결론:결양조기신경원개격활갑통도유자신격활작용,당개격활갑통도격활시,갑리자외류증가,산생막적복겁화,사거겁화불역산생,종이은정세포막급강저세포적흥강성,저가능시결양조기신경원자신적일충대상궤제.
