北京林业大学学报
北京林業大學學報
북경임업대학학보
JOURNAL OF BEIJING FORESTRY UNIVERSITY
2007年
1期
119-122
,共4页
张春晓%盖颖%朱艳燕%陈雪梅%蒋湘宁
張春曉%蓋穎%硃豔燕%陳雪梅%蔣湘寧
장춘효%개영%주염연%진설매%장상저
毛白杨%双向启动子%gfp基因%gusA基因%瞬时表达
毛白楊%雙嚮啟動子%gfp基因%gusA基因%瞬時錶達
모백양%쌍향계동자%gfp기인%gusA기인%순시표체
该研究通过PCR扩增、酶切及连接等分子生物学研究方法分别将β-葡萄糖苷酶基因(gusA)和绿色荧光蛋白基因(gfp)与双向启动子两端融合,构建成双可视报告基因融合双向启动子的植物二元表达载体pBDGG.通过农杆菌介导的叶盘法转化毛白杨叶片以鉴定所构建的双向启动子的功能.对农杆菌侵染3～4 d的毛白杨同一叶片进行GUS组织化学染色检测和紫外激发后通过荧光显微镜观测绿色荧光,结果表明gusA基因和gfp基因都能够进行瞬时表达,表明该双向启动子可在毛白杨中实现双向表达.该文还讨论了双向启动子在植物基因工程中应用的可能性,为实现植物基因工程的"一箭双星"(即一个启动子同时双向表达两个或多个基因)奠定基础.
該研究通過PCR擴增、酶切及連接等分子生物學研究方法分彆將β-葡萄糖苷酶基因(gusA)和綠色熒光蛋白基因(gfp)與雙嚮啟動子兩耑融閤,構建成雙可視報告基因融閤雙嚮啟動子的植物二元錶達載體pBDGG.通過農桿菌介導的葉盤法轉化毛白楊葉片以鑒定所構建的雙嚮啟動子的功能.對農桿菌侵染3～4 d的毛白楊同一葉片進行GUS組織化學染色檢測和紫外激髮後通過熒光顯微鏡觀測綠色熒光,結果錶明gusA基因和gfp基因都能夠進行瞬時錶達,錶明該雙嚮啟動子可在毛白楊中實現雙嚮錶達.該文還討論瞭雙嚮啟動子在植物基因工程中應用的可能性,為實現植物基因工程的"一箭雙星"(即一箇啟動子同時雙嚮錶達兩箇或多箇基因)奠定基礎.
해연구통과PCR확증、매절급련접등분자생물학연구방법분별장β-포도당감매기인(gusA)화록색형광단백기인(gfp)여쌍향계동자량단융합,구건성쌍가시보고기인융합쌍향계동자적식물이원표체재체pBDGG.통과농간균개도적협반법전화모백양협편이감정소구건적쌍향계동자적공능.대농간균침염3～4 d적모백양동일협편진행GUS조직화학염색검측화자외격발후통과형광현미경관측록색형광,결과표명gusA기인화gfp기인도능구진행순시표체,표명해쌍향계동자가재모백양중실현쌍향표체.해문환토론료쌍향계동자재식물기인공정중응용적가능성,위실현식물기인공정적"일전쌍성"(즉일개계동자동시쌍향표체량개혹다개기인)전정기출.
