动物学报
動物學報
동물학보
ACTA ZOOLOGICA SINICA
2008年
6期
1051-1060
,共10页
胡重江%吴风瑞%刘智皓%黄宝锋%张耀光%王德寿
鬍重江%吳風瑞%劉智皓%黃寶鋒%張耀光%王德壽
호중강%오풍서%류지호%황보봉%장요광%왕덕수
南方鲇%Vasa基因克隆%选择性剪接%表达%RT-PCR%原位杂交
南方鲇%Vasa基因剋隆%選擇性剪接%錶達%RT-PCR%原位雜交
남방점%Vasa기인극륭%선택성전접%표체%RT-PCR%원위잡교
采用RT-PCR和RACE相结合的方法,从南方鲇分离到Vasa基因的两个亚型scVasa和scVasa-s.它们是同一基因在5'端经选择性剪接的产物,其cDNA全长分别为2525 bp和2438 bp,编码662和641个氨基酸.两者均具有DEAD-box家族成员特有的8个保守基序和Vasa的典型特征.南方鲇Vasa与银鲫相似性最高(73.3%).两个亚型均特异地表达于雌雄性腺中.原位杂交结果表明:scVasa主要在卵巢I、Ⅱ时相的卵母细胞和精巢的精原细胞和初级精母细胞中表达.半定量PCR结果显示,在生殖周期中,两种亚型在以Ⅱ时相卵母细胞为主体的卵巢恢复期表达均高于以Ⅲ-Ⅳ时相卵母细胞为主体的卵黄生成期[动物学报54(6):1051-1060,2008].
採用RT-PCR和RACE相結閤的方法,從南方鲇分離到Vasa基因的兩箇亞型scVasa和scVasa-s.它們是同一基因在5'耑經選擇性剪接的產物,其cDNA全長分彆為2525 bp和2438 bp,編碼662和641箇氨基痠.兩者均具有DEAD-box傢族成員特有的8箇保守基序和Vasa的典型特徵.南方鲇Vasa與銀鯽相似性最高(73.3%).兩箇亞型均特異地錶達于雌雄性腺中.原位雜交結果錶明:scVasa主要在卵巢I、Ⅱ時相的卵母細胞和精巢的精原細胞和初級精母細胞中錶達.半定量PCR結果顯示,在生殖週期中,兩種亞型在以Ⅱ時相卵母細胞為主體的卵巢恢複期錶達均高于以Ⅲ-Ⅳ時相卵母細胞為主體的卵黃生成期[動物學報54(6):1051-1060,2008].
채용RT-PCR화RACE상결합적방법,종남방점분리도Vasa기인적량개아형scVasa화scVasa-s.타문시동일기인재5'단경선택성전접적산물,기cDNA전장분별위2525 bp화2438 bp,편마662화641개안기산.량자균구유DEAD-box가족성원특유적8개보수기서화Vasa적전형특정.남방점Vasa여은즉상사성최고(73.3%).량개아형균특이지표체우자웅성선중.원위잡교결과표명:scVasa주요재란소I、Ⅱ시상적란모세포화정소적정원세포화초급정모세포중표체.반정량PCR결과현시,재생식주기중,량충아형재이Ⅱ시상란모세포위주체적란소회복기표체균고우이Ⅲ-Ⅳ시상란모세포위주체적란황생성기[동물학보54(6):1051-1060,2008].
