中国水产科学
中國水產科學
중국수산과학
Journal of Fishery Sciences of China
2010年
3期
431-438
,共8页
范玉顶%陈妍婕%钟其旺%齐洁%张全启
範玉頂%陳妍婕%鐘其旺%齊潔%張全啟
범옥정%진연첩%종기왕%제길%장전계
牙鲆%鳗弧菌%基因表达%mRAN差异显示%半定量RT-PCR
牙鲆%鰻弧菌%基因錶達%mRAN差異顯示%半定量RT-PCR
아평%만호균%기인표체%mRAN차이현시%반정량RT-PCR
本研究采用mRNA差异显示技术(mRNA differentid display,DD-PCR)分离得到20个鳗弧菌(Vibrio anguillarum)诱导前后差异表达的牙鲆(Paralichthys olivaceus)cDNA片段.通过对差异片段进行回收、再扩增、克隆、测序、序列比对以及验证分析后,得到9个阳性片段,其中2个片段与已知基因高度同源,一个与牙鲆C3补体高度同源,同源性98%,另-个与牙鲆TEGT(睾丸增强基因转录子)基因高度同源,同源性98%;其余7个为新的cDNA片段.基因表达分析表明,这9个差异片段均在处理组、对照组的不同器官和时间段差异表达,而且多数片段经鳗弧菌诱导后都在肝脏、肾脏、脾脏等鱼类主要免疫器官中上调表达,初步推测它们都是和牙鲆免疫或鳗弧菌病相关的基因.对这些基因进一步的功能研究将对牙鲆的抗病育种及养殖业提供重要的参考.
本研究採用mRNA差異顯示技術(mRNA differentid display,DD-PCR)分離得到20箇鰻弧菌(Vibrio anguillarum)誘導前後差異錶達的牙鲆(Paralichthys olivaceus)cDNA片段.通過對差異片段進行迴收、再擴增、剋隆、測序、序列比對以及驗證分析後,得到9箇暘性片段,其中2箇片段與已知基因高度同源,一箇與牙鲆C3補體高度同源,同源性98%,另-箇與牙鲆TEGT(睪汍增彊基因轉錄子)基因高度同源,同源性98%;其餘7箇為新的cDNA片段.基因錶達分析錶明,這9箇差異片段均在處理組、對照組的不同器官和時間段差異錶達,而且多數片段經鰻弧菌誘導後都在肝髒、腎髒、脾髒等魚類主要免疫器官中上調錶達,初步推測它們都是和牙鲆免疫或鰻弧菌病相關的基因.對這些基因進一步的功能研究將對牙鲆的抗病育種及養殖業提供重要的參攷.
본연구채용mRNA차이현시기술(mRNA differentid display,DD-PCR)분리득도20개만호균(Vibrio anguillarum)유도전후차이표체적아평(Paralichthys olivaceus)cDNA편단.통과대차이편단진행회수、재확증、극륭、측서、서렬비대이급험증분석후,득도9개양성편단,기중2개편단여이지기인고도동원,일개여아평C3보체고도동원,동원성98%,령-개여아평TEGT(고환증강기인전록자)기인고도동원,동원성98%;기여7개위신적cDNA편단.기인표체분석표명,저9개차이편단균재처리조、대조조적불동기관화시간단차이표체,이차다수편단경만호균유도후도재간장、신장、비장등어류주요면역기관중상조표체,초보추측타문도시화아평면역혹만호균병상관적기인.대저사기인진일보적공능연구장대아평적항병육충급양식업제공중요적삼고.