中国心血管病研究
中國心血管病研究
중국심혈관병연구
CHINESE JOURNAL OF CARDIOVASCULAR REVIEW
2010年
7期
528-533
,共6页
张凤伟%吴树明%曹广庆%陆现硕
張鳳偉%吳樹明%曹廣慶%陸現碩
장봉위%오수명%조엄경%륙현석
一氧化氮合酶基因%腺病毒载体%肺动脉高压%基因治疗%兔
一氧化氮閤酶基因%腺病毒載體%肺動脈高壓%基因治療%兔
일양화담합매기인%선병독재체%폐동맥고압%기인치료%토
目的 探讨携带内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因的复制缺陷型重组腺病毒载体(AdCMVeNOS)转染对左向右分流所致的肺动脉高压及肺动脉高压危象兔模型的影响.方法 18只肺动脉高压模型兔随机分成实验组(9只)和对照组(9只).实验组气管内滴入AdCMVeNOS病毒转染液(5×109 PFU/ml)2 ml,对照组气管内滴入生理盐水2 ml.4 d后手术结扎左向右分流,气管插管吸入10%氧气,检测两组模型缺氧前、后肺动脉收缩压(SPAP)、肺动脉平均压(MPAP)和平均动脉压(MAP)的变化.处死模型后,硝酸还原酶法测定肺组织的NO浓度,检测外源性eNOS基因mRNA及蛋白表达.结果 AdCMVeNOS转染后4 d和缺氧前,实验组肺动脉压较转染前明显下降(P<0.01),而对照组肺动脉压无明显改变,与实验组比较,差异具有统计学意义(P<0.05).实验组在缺氧1 h后,有4只兔出现肺动脉高压危象,对照组在缺氧30 min时,3只兔出现肺动脉高压危象,缺氧1 h后,全部出现肺动脉高压危象.两组在低氧通气后均出现氧分压(PaO2)降低,SPAP和MPAP升高,二氧化碳分压(PaCO2)升高,MAP降低.恢复供氧后,实验组各测得值恢复至正常水平,对照组SPAP和MPAP高于基础值,MAP低于基础值(P<0.01),实验组SPAP、MPAP和PaCO2的升高幅度及MAP和PaO2的降低幅度均低于对照组(P<0.01).免疫组化染色示,实验组肺泡内皮细胞、肺中小血管的平滑肌细胞和内皮细胞eNOS表达较对照组明显增加.实验组肺组织NO浓度明显高于对照组(P<0.01).RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后,实验组在3.77 kb处扩增出特异条带,而对照组在3.77 kb处未扩增出特异条带.Western blot分析显示,实验组兔肺组织eNOS(135 kDa)蛋白表达与对照组相比明显增加.结论 AdCMVeNOS转染左向右分流所致的兔肺动脉高压动物模型后,可有效降低肺动脉高压兔的肺动脉压和由缺氧诱发肺动脉高压危象的发生率.
目的 探討攜帶內皮型一氧化氮閤酶(eNOS)基因的複製缺陷型重組腺病毒載體(AdCMVeNOS)轉染對左嚮右分流所緻的肺動脈高壓及肺動脈高壓危象兔模型的影響.方法 18隻肺動脈高壓模型兔隨機分成實驗組(9隻)和對照組(9隻).實驗組氣管內滴入AdCMVeNOS病毒轉染液(5×109 PFU/ml)2 ml,對照組氣管內滴入生理鹽水2 ml.4 d後手術結扎左嚮右分流,氣管插管吸入10%氧氣,檢測兩組模型缺氧前、後肺動脈收縮壓(SPAP)、肺動脈平均壓(MPAP)和平均動脈壓(MAP)的變化.處死模型後,硝痠還原酶法測定肺組織的NO濃度,檢測外源性eNOS基因mRNA及蛋白錶達.結果 AdCMVeNOS轉染後4 d和缺氧前,實驗組肺動脈壓較轉染前明顯下降(P<0.01),而對照組肺動脈壓無明顯改變,與實驗組比較,差異具有統計學意義(P<0.05).實驗組在缺氧1 h後,有4隻兔齣現肺動脈高壓危象,對照組在缺氧30 min時,3隻兔齣現肺動脈高壓危象,缺氧1 h後,全部齣現肺動脈高壓危象.兩組在低氧通氣後均齣現氧分壓(PaO2)降低,SPAP和MPAP升高,二氧化碳分壓(PaCO2)升高,MAP降低.恢複供氧後,實驗組各測得值恢複至正常水平,對照組SPAP和MPAP高于基礎值,MAP低于基礎值(P<0.01),實驗組SPAP、MPAP和PaCO2的升高幅度及MAP和PaO2的降低幅度均低于對照組(P<0.01).免疫組化染色示,實驗組肺泡內皮細胞、肺中小血管的平滑肌細胞和內皮細胞eNOS錶達較對照組明顯增加.實驗組肺組織NO濃度明顯高于對照組(P<0.01).RT-PCR產物經瓊脂糖凝膠電泳後,實驗組在3.77 kb處擴增齣特異條帶,而對照組在3.77 kb處未擴增齣特異條帶.Western blot分析顯示,實驗組兔肺組織eNOS(135 kDa)蛋白錶達與對照組相比明顯增加.結論 AdCMVeNOS轉染左嚮右分流所緻的兔肺動脈高壓動物模型後,可有效降低肺動脈高壓兔的肺動脈壓和由缺氧誘髮肺動脈高壓危象的髮生率.
목적 탐토휴대내피형일양화담합매(eNOS)기인적복제결함형중조선병독재체(AdCMVeNOS)전염대좌향우분류소치적폐동맥고압급폐동맥고압위상토모형적영향.방법 18지폐동맥고압모형토수궤분성실험조(9지)화대조조(9지).실험조기관내적입AdCMVeNOS병독전염액(5×109 PFU/ml)2 ml,대조조기관내적입생리염수2 ml.4 d후수술결찰좌향우분류,기관삽관흡입10%양기,검측량조모형결양전、후폐동맥수축압(SPAP)、폐동맥평균압(MPAP)화평균동맥압(MAP)적변화.처사모형후,초산환원매법측정폐조직적NO농도,검측외원성eNOS기인mRNA급단백표체.결과 AdCMVeNOS전염후4 d화결양전,실험조폐동맥압교전염전명현하강(P<0.01),이대조조폐동맥압무명현개변,여실험조비교,차이구유통계학의의(P<0.05).실험조재결양1 h후,유4지토출현폐동맥고압위상,대조조재결양30 min시,3지토출현폐동맥고압위상,결양1 h후,전부출현폐동맥고압위상.량조재저양통기후균출현양분압(PaO2)강저,SPAP화MPAP승고,이양화탄분압(PaCO2)승고,MAP강저.회복공양후,실험조각측득치회복지정상수평,대조조SPAP화MPAP고우기출치,MAP저우기출치(P<0.01),실험조SPAP、MPAP화PaCO2적승고폭도급MAP화PaO2적강저폭도균저우대조조(P<0.01).면역조화염색시,실험조폐포내피세포、폐중소혈관적평활기세포화내피세포eNOS표체교대조조명현증가.실험조폐조직NO농도명현고우대조조(P<0.01).RT-PCR산물경경지당응효전영후,실험조재3.77 kb처확증출특이조대,이대조조재3.77 kb처미확증출특이조대.Western blot분석현시,실험조토폐조직eNOS(135 kDa)단백표체여대조조상비명현증가.결론 AdCMVeNOS전염좌향우분류소치적토폐동맥고압동물모형후,가유효강저폐동맥고압토적폐동맥압화유결양유발폐동맥고압위상적발생솔.
