华北农学报
華北農學報
화북농학보
ACTA AGRICULTURAE BOREALI-SINICA
2010年
z1期
32-37
,共6页
杨清%苏光荣%韩蕾%王正良%孙启祥%彭镇华
楊清%囌光榮%韓蕾%王正良%孫啟祥%彭鎮華
양청%소광영%한뢰%왕정량%손계상%팽진화
版纳甜龙竹%DNA提取%AFLP%影响因素
版納甜龍竹%DNA提取%AFLP%影響因素
판납첨룡죽%DNA제취%AFLP%영향인소
用改进的CTAB法,在提取液中加入2% PVP (V/V)和2%β-巯基乙醇,提取到了高质量的基因组DNA,OD260/OD280在1.7～1.9之间,蛋白质、多酚类、色素、RNA等去除较彻底,适于AFLP分析.通过对版纳甜龙竹DNA提取、酶切连接、预扩增、选择性扩增等试验过程中各关键因素的比较研究,建立了优化的AFLP分子标记体系,得到了清晰的AFLP银染指纹图谱,试验结果重复性好.从 64对 Mse I和Pst I引物中筛选出8对扩增效果好的引物,利用筛选出8对引物对30份材料进行分析,共扩增出 256条多态性带,获得32 490个扩增位点,有13 289个位点具有多态性,平均每对引物获得4 061.25个扩增位点,其中具有多态性的位点为1 661.125个,平均多态检出率为40.90%,8对引物组合对版纳甜龙竹30个个体的区分率达到100%.表明AFLP用于版纳甜龙竹种内不同材料间的遗传变异性分析是可行的 .
用改進的CTAB法,在提取液中加入2% PVP (V/V)和2%β-巰基乙醇,提取到瞭高質量的基因組DNA,OD260/OD280在1.7～1.9之間,蛋白質、多酚類、色素、RNA等去除較徹底,適于AFLP分析.通過對版納甜龍竹DNA提取、酶切連接、預擴增、選擇性擴增等試驗過程中各關鍵因素的比較研究,建立瞭優化的AFLP分子標記體繫,得到瞭清晰的AFLP銀染指紋圖譜,試驗結果重複性好.從 64對 Mse I和Pst I引物中篩選齣8對擴增效果好的引物,利用篩選齣8對引物對30份材料進行分析,共擴增齣 256條多態性帶,穫得32 490箇擴增位點,有13 289箇位點具有多態性,平均每對引物穫得4 061.25箇擴增位點,其中具有多態性的位點為1 661.125箇,平均多態檢齣率為40.90%,8對引物組閤對版納甜龍竹30箇箇體的區分率達到100%.錶明AFLP用于版納甜龍竹種內不同材料間的遺傳變異性分析是可行的 .
용개진적CTAB법,재제취액중가입2% PVP (V/V)화2%β-구기을순,제취도료고질량적기인조DNA,OD260/OD280재1.7～1.9지간,단백질、다분류、색소、RNA등거제교철저,괄우AFLP분석.통과대판납첨룡죽DNA제취、매절련접、예확증、선택성확증등시험과정중각관건인소적비교연구,건립료우화적AFLP분자표기체계,득도료청석적AFLP은염지문도보,시험결과중복성호.종 64대 Mse I화Pst I인물중사선출8대확증효과호적인물,이용사선출8대인물대30빈재료진행분석,공확증출 256조다태성대,획득32 490개확증위점,유13 289개위점구유다태성,평균매대인물획득4 061.25개확증위점,기중구유다태성적위점위1 661.125개,평균다태검출솔위40.90%,8대인물조합대판납첨룡죽30개개체적구분솔체도100%.표명AFLP용우판납첨룡죽충내불동재료간적유전변이성분석시가행적 .
