中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2010年
12期
1581-1586
,共6页
曹云海%陈熙%张程%石嫦娥%徐德祥%许建明
曹雲海%陳熙%張程%石嫦娥%徐德祥%許建明
조운해%진희%장정%석항아%서덕상%허건명
利福平%胆汁淤积%肝损伤%胆汁酸转运体%胆汁酸输出泵%多药抵抗相关蛋白-2
利福平%膽汁淤積%肝損傷%膽汁痠轉運體%膽汁痠輸齣泵%多藥牴抗相關蛋白-2
리복평%담즙어적%간손상%담즙산전운체%담즙산수출빙%다약저항상관단백-2
目的 利福平(Rifampicin, RIF)具有肝毒性,但其机制尚不清楚.本研究在RIF诱导的肝内胆汁淤积小鼠中,探讨RIF对肝细胞胆汁酸转运体胆汁酸输出泵(bile salt export pump, Bsep)和多药抵抗相关蛋白-2(multidrug resistance-associated protein-2, Mrp2)表达和定位影响.方法 48只♀ ICR小鼠随机分为4组,RIF 1 wk组:经灌胃给予RIF(200 mg·kg-1·d -1),连续1周,于末次给药后6 h取材;RIF 6 h组:单次灌胃给予RIF(200 mg·kg-1)后6 h取材;RIF 1周对照组(CON 1 wk)与RIF 6 h对照组 (CON 6 h):经灌胃给予等容积生理盐水.所有小鼠均收集血液和肝组织,常规生化检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB)和结合胆红素(DB),并检测小鼠血清和肝组织总胆汁酸(TBA)水平.HE染色分析肝组织病理改变.RT-PCR测定肝脏肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2 mRNA表达.免疫荧光法分析Bsep和Mrp2在肝细胞的位置.结果 给予RIF 1周后,小鼠血清TB由(1.25±0.69) μmol·L-1上升至(65.73±12.08) μmol·L-1,上升近70倍,DB由(0.77±0.40) μmol·L-1上升至(53.33±12.43) μmol·L-1,上升约80倍,ALP由(110.2±13.8) U·L-1上升至(279.5±80.4) U·L-1,上升约1.5倍,TBA由(3.15±0.89) μmol·L-1上升至(13.54±6.51) μmol·L-1,上升约5倍并伴有血清ALT和AST轻度升高;肝脏组织TBA由(0.15±0.04) μmol·g-1 liver上升至(0.30±0.19) μmol·g-1 liver,上升约2倍;肝脏组织HE染色显示肝细胞出现脂肪变性、轻度坏死和炎症.单次给予RIF 6 h后血清TB、DB、ALP、ALT、AST和TBA明显上升,但未观察到小鼠肝脏组织病理发生改变.免疫荧光分析显示,给予小鼠RIF 1 wk与单次给予RIF 6 h后肝细胞中Bsep和Mrp2的定位发生了改变.而无论单次给予RIF还是连续给药1周,肝细胞Bsep和Mrp2 mRNA表达水平均未发生变化.结论 肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2定位改变可能是RIF诱发肝内胆汁淤积的重要机制.
目的 利福平(Rifampicin, RIF)具有肝毒性,但其機製尚不清楚.本研究在RIF誘導的肝內膽汁淤積小鼠中,探討RIF對肝細胞膽汁痠轉運體膽汁痠輸齣泵(bile salt export pump, Bsep)和多藥牴抗相關蛋白-2(multidrug resistance-associated protein-2, Mrp2)錶達和定位影響.方法 48隻♀ ICR小鼠隨機分為4組,RIF 1 wk組:經灌胃給予RIF(200 mg·kg-1·d -1),連續1週,于末次給藥後6 h取材;RIF 6 h組:單次灌胃給予RIF(200 mg·kg-1)後6 h取材;RIF 1週對照組(CON 1 wk)與RIF 6 h對照組 (CON 6 h):經灌胃給予等容積生理鹽水.所有小鼠均收集血液和肝組織,常規生化檢測血清丙氨痠氨基轉移酶(ALT)、天鼕氨痠氨基轉移酶(AST)、堿性燐痠酶(ALP)、總膽紅素(TB)和結閤膽紅素(DB),併檢測小鼠血清和肝組織總膽汁痠(TBA)水平.HE染色分析肝組織病理改變.RT-PCR測定肝髒肝細胞膽汁痠轉運體Bsep和Mrp2 mRNA錶達.免疫熒光法分析Bsep和Mrp2在肝細胞的位置.結果 給予RIF 1週後,小鼠血清TB由(1.25±0.69) μmol·L-1上升至(65.73±12.08) μmol·L-1,上升近70倍,DB由(0.77±0.40) μmol·L-1上升至(53.33±12.43) μmol·L-1,上升約80倍,ALP由(110.2±13.8) U·L-1上升至(279.5±80.4) U·L-1,上升約1.5倍,TBA由(3.15±0.89) μmol·L-1上升至(13.54±6.51) μmol·L-1,上升約5倍併伴有血清ALT和AST輕度升高;肝髒組織TBA由(0.15±0.04) μmol·g-1 liver上升至(0.30±0.19) μmol·g-1 liver,上升約2倍;肝髒組織HE染色顯示肝細胞齣現脂肪變性、輕度壞死和炎癥.單次給予RIF 6 h後血清TB、DB、ALP、ALT、AST和TBA明顯上升,但未觀察到小鼠肝髒組織病理髮生改變.免疫熒光分析顯示,給予小鼠RIF 1 wk與單次給予RIF 6 h後肝細胞中Bsep和Mrp2的定位髮生瞭改變.而無論單次給予RIF還是連續給藥1週,肝細胞Bsep和Mrp2 mRNA錶達水平均未髮生變化.結論 肝細胞膽汁痠轉運體Bsep和Mrp2定位改變可能是RIF誘髮肝內膽汁淤積的重要機製.
목적 리복평(Rifampicin, RIF)구유간독성,단기궤제상불청초.본연구재RIF유도적간내담즙어적소서중,탐토RIF대간세포담즙산전운체담즙산수출빙(bile salt export pump, Bsep)화다약저항상관단백-2(multidrug resistance-associated protein-2, Mrp2)표체화정위영향.방법 48지♀ ICR소서수궤분위4조,RIF 1 wk조:경관위급여RIF(200 mg·kg-1·d -1),련속1주,우말차급약후6 h취재;RIF 6 h조:단차관위급여RIF(200 mg·kg-1)후6 h취재;RIF 1주대조조(CON 1 wk)여RIF 6 h대조조 (CON 6 h):경관위급여등용적생리염수.소유소서균수집혈액화간조직,상규생화검측혈청병안산안기전이매(ALT)、천동안산안기전이매(AST)、감성린산매(ALP)、총담홍소(TB)화결합담홍소(DB),병검측소서혈청화간조직총담즙산(TBA)수평.HE염색분석간조직병리개변.RT-PCR측정간장간세포담즙산전운체Bsep화Mrp2 mRNA표체.면역형광법분석Bsep화Mrp2재간세포적위치.결과 급여RIF 1주후,소서혈청TB유(1.25±0.69) μmol·L-1상승지(65.73±12.08) μmol·L-1,상승근70배,DB유(0.77±0.40) μmol·L-1상승지(53.33±12.43) μmol·L-1,상승약80배,ALP유(110.2±13.8) U·L-1상승지(279.5±80.4) U·L-1,상승약1.5배,TBA유(3.15±0.89) μmol·L-1상승지(13.54±6.51) μmol·L-1,상승약5배병반유혈청ALT화AST경도승고;간장조직TBA유(0.15±0.04) μmol·g-1 liver상승지(0.30±0.19) μmol·g-1 liver,상승약2배;간장조직HE염색현시간세포출현지방변성、경도배사화염증.단차급여RIF 6 h후혈청TB、DB、ALP、ALT、AST화TBA명현상승,단미관찰도소서간장조직병리발생개변.면역형광분석현시,급여소서RIF 1 wk여단차급여RIF 6 h후간세포중Bsep화Mrp2적정위발생료개변.이무론단차급여RIF환시련속급약1주,간세포Bsep화Mrp2 mRNA표체수평균미발생변화.결론 간세포담즙산전운체Bsep화Mrp2정위개변가능시RIF유발간내담즙어적적중요궤제.
