遗传
遺傳
유전
HEREDITAS(BEIJING)
2011年
12期
1353-1358
,共6页
焦莎莎%刘卡%李刚%高剑峰%马润林
焦莎莎%劉卡%李剛%高劍峰%馬潤林
초사사%류잡%리강%고검봉%마윤림
绵羊%MHC%新基因%表达分析
綿羊%MHC%新基因%錶達分析
면양%MHC%신기인%표체분석
对新疆美利奴细毛羊基因组MHC(Major histocompatibility complex)区段细菌人工染色体(BAC)文库的DNA序列进行测定,经过序列比对分析,首次预测了约130个新基因,其中有8个CDS(Coding sequences)未在其他物种中发现其同源序列,推测可能系绵羊所特有.在此基础上,文章对绵羊MHC区段预测的3个新基因(分别命名为OaN2、OaN5、OaN6)进行了实验验证和表达分析.从绵羊肺组织中克隆到了OaN2的cDNA序列,其长度为270 bp;从肠系淋巴结中扩增得到OaN5和OaN6的cDNA序列,长度分别为309 bp和205 bp.上述3个基因的GenBank登录号分别为JF330782、JF330783和JF330784.利用Northern blotting技术进行转录本水平分析,发现这3个新基因均在免疫器官肠系淋巴结中高表达.通过Western blotting和原位免疫组化技术对OaN2蛋白水平进行了表达谱分析,结果表明OaN2蛋白在绵羊脾脏和肠系淋巴结等免疫器官中高表达,在心、肝及胰脏中不表达.这是首次通过实验验证绵羊MHC区段的3个预测的新基因,为其在绵羊免疫器官中的功能研究奠定了基础.
對新疆美利奴細毛羊基因組MHC(Major histocompatibility complex)區段細菌人工染色體(BAC)文庫的DNA序列進行測定,經過序列比對分析,首次預測瞭約130箇新基因,其中有8箇CDS(Coding sequences)未在其他物種中髮現其同源序列,推測可能繫綿羊所特有.在此基礎上,文章對綿羊MHC區段預測的3箇新基因(分彆命名為OaN2、OaN5、OaN6)進行瞭實驗驗證和錶達分析.從綿羊肺組織中剋隆到瞭OaN2的cDNA序列,其長度為270 bp;從腸繫淋巴結中擴增得到OaN5和OaN6的cDNA序列,長度分彆為309 bp和205 bp.上述3箇基因的GenBank登錄號分彆為JF330782、JF330783和JF330784.利用Northern blotting技術進行轉錄本水平分析,髮現這3箇新基因均在免疫器官腸繫淋巴結中高錶達.通過Western blotting和原位免疫組化技術對OaN2蛋白水平進行瞭錶達譜分析,結果錶明OaN2蛋白在綿羊脾髒和腸繫淋巴結等免疫器官中高錶達,在心、肝及胰髒中不錶達.這是首次通過實驗驗證綿羊MHC區段的3箇預測的新基因,為其在綿羊免疫器官中的功能研究奠定瞭基礎.
대신강미리노세모양기인조MHC(Major histocompatibility complex)구단세균인공염색체(BAC)문고적DNA서렬진행측정,경과서렬비대분석,수차예측료약130개신기인,기중유8개CDS(Coding sequences)미재기타물충중발현기동원서렬,추측가능계면양소특유.재차기출상,문장대면양MHC구단예측적3개신기인(분별명명위OaN2、OaN5、OaN6)진행료실험험증화표체분석.종면양폐조직중극륭도료OaN2적cDNA서렬,기장도위270 bp;종장계림파결중확증득도OaN5화OaN6적cDNA서렬,장도분별위309 bp화205 bp.상술3개기인적GenBank등록호분별위JF330782、JF330783화JF330784.이용Northern blotting기술진행전록본수평분석,발현저3개신기인균재면역기관장계림파결중고표체.통과Western blotting화원위면역조화기술대OaN2단백수평진행료표체보분석,결과표명OaN2단백재면양비장화장계림파결등면역기관중고표체,재심、간급이장중불표체.저시수차통과실험험증면양MHC구단적3개예측적신기인,위기재면양면역기관중적공능연구전정료기출.
